Ontwikkeling van een humaan co-culture model voor ontsteking en sensitisatie in de huid.

Psoriasis komt veel voor en geeft de patiënt veel last. De behandelingsmethoden
tegen psoriasis zijn nog verre van optimaal. Om een nieuw geneesmiddel te
kunnen ontwikkelen is het vaak nodig om deze eerst te testen op een proefdier.
De huid van een proefdier verschilt echter met die van de mens, zeker met die
van een patiënt met psoriasis. De afdeling Biosciences van TNO heeft echter
laten zien dat het mogelijk is om een stukje gezonde huid van een patiënt te
transplanteren naar een muis. Als men later bepaalde bloedcellen van de patiënt
in het getransplanteerde stukje huid inspuit dan kan daarin een reactie
optreden met kenmerken van psoriasis. Door de ontwikkeling van een snelle,
goedkopere en humane ex vivo variant van het model wordt in dit project beoogd
markers voor zowel effectiviteit als veiligheid te identificeren en tevens
nadere onderbouwing te verwerven van het ziektemechanisme in het in vivo model.
Dit laatste biedt de mogelijkheid om de beperkte kennis van onderliggende
(immunologische) mechanismen van het in vivo model te vergroten.

In dit project zal een in vitro kweek systeem worden opgezet gebruik makend van
niet aangedane humane huid (afkomstig van psoriasis patiënten) in combinatie
met gestimuleerde lymfocyten van patiënten met psoriasis (PBMC). Het ex vivo
bewerkstelligen van hyperplasie (verdikking epidermis) door interactie met
geactiveerde T-cellen (PBMC) staat centraal in dit voorstel.
Dit voorstel beoogt aldus een snelle evaluatie van effectiviteit en toxiciteit
in één model te combineren. Tenslotte biedt het voorstel het perspectief op
vermindering van gebruik van proefdieren.

Bij het opzetten van het in vitro model vanuit het gehumaniseerde in vivo model
van psoriasis zal allereerst uitgezocht worden of het mogelijk is ex vivo
ontsteking resulterend in epidermale verdikking te bewerkstelligen. Dit is een
cruciale stap en vormt de basis voor alle vervolgstappen (7 patiënten, waarvan
2 patiënten huid en bloed afstaan voor het vaststellen van de viability van non
lesionale psoriasis huid en 5 voor de *proof of principle* tijdens de psoriasis
effector/inductie fase).

Vervolgens wordt het model gevalideerd met bekende referentiestoffen (Hiervoor
zal in de toekomst een aparte, nieuwe METC aanvraag worden gedaan). Tevens
worden referentieverbindingen aangeboden waarvan bekend is dat ze toxische
eigenschappen bezitten. Onderzocht zal worden of het model geschikt is om in
keratinocyten van de epidermis DNA schade te meten. Verder volgt onderzoek van
de respons op chemische antigenen en validatie van markers voor ontsteking en
herstel. Het projectplan is nader uitgewerkt in onderstaand stappenplan

Uitwerking stappenplan: zie projectplan TNO

Voor de patiënten die hebben deelgenomen aan dit onderzoek heeft TNO een
verzekering afgesloten en zijn de medische risico*s laag. Een week na het
afnemen van bloed en biopten en het plaatsen van de hechting worden de
hechtingen bij het onderzoekscentrum verwijderd en vind nacontrole plaats.
Tevens wordt de huisarts geïnformeerd over deelname.
Het experimentele onderzoek vindt geheel plaats bij onderzoeksorganisatie TNO
te Leiden en Zeist, de hoofdaannemer voor deze studie. Het eindpunt van de
studie bestaat uit histologische analyse van de gekweekte humane huidbiopten.
Na beëindiging van deze studie worden alle humane onderzoeks materialen
vernietigd.