Experimentele CFTR correctors voor de behandeling van cystische fibrose

Effectieve medicijnen voor de behandeling van cystische fibrose (CF) patienten
met mutaties die de maturatie van het CFTR eiwit verhinderen zijn nog niet
beschikbaar. De long en lever pathologie die bij CF optreedt is nog niet goed
te behandelen in deze patienten. Nieuwe medicamenten moeten worden ontwikkeld
die gericht zijn op specifieke, ook zeldzame, mutaties, specifieke weefsels en
zelfs specifieke patienten.

Tot nut toe zijn geimmortaliseerde model cellijnen in kweek gebruikt om
kandidaat moleculen te selecteren in grootschalige exerimenten, maar deze
blijken beperkte voorspellende waarde te hebben voor klinische toepassingen. De
complexe maturatie van CFTR in gedifferentieerde epitheelcellen vraagt om
cel-modellen die de eigenschappen van de aangedane organen beter weergeven.
Echter, het grootschalig screenen van moleculen gricht op zeldzame mutaties kan
niet worden toegepast op primaire cellen die een beperkte beschikbaarheid,
levensduur en differentiatie potentieel hebben in kweek.

Om in deze behoefte te kunnen voorzien genereren we in het kader van ons
onderzoeksproject geinduceerde pluripotente stamcellen (iPSC's) van CF
patiënten homozygoot voor veel voorkomende (F508del) en zeldzame CFTR maturatie
mutaties. De iPSC's worden genetisch gecorrigeerd om een positieve controle
te verkrijgen, en om fluorescente merker eiwitten tot expressie te brengen
waarmee grootschalige selectie van medicamenten kan worden uitgevoerd.
Moleculen die op deze wijze zijn geidentificeerd worden verder gevalideerd in
orgaanspecifieke weefselkweeek, gebruikmakend van de iPSC's. In deze benadering
is het mogelijk om een combinatie van medicamenten te testen in een
gepersonaliseerd model van long en lever pathologie.

Het doel van de huidige aanvraag is om celmateriaal te verkrijgen in de vorm
van bloed, van twee patiënten die homozygoot zijn voor de N1303K CFTR maturatie
mutatie, waarvoor geen effective behandeling beschikbaar is,om hiermee
pluripotente stamcellen te genereren, voor functionele tests in vitro (als
boven beschreven en in het protocol 1. introduction and rationale).

Als beschreven in het Protocol (Study design en 6 Methods). De twee
bloedmonsters worden gebruikt voor het genereren van iPSC, en in het
laboratorium gebruikt voor het identificeren en testen van nieuwe medicamenten
voor de behandeling van cystische Fibrose.

Alleen patiënten met bekende en relevante mutaties (zeldzame CFTR maturatie
defecten) worden geincludeerd, in dit geval twee patienten met een N1303k
mutatie, 11 en 24 jaar oud. Deze studies zullen bijdragen aan het ontwikkelen
van een effectieve behandeling van dragers van deze mutatie

Bloedmonsters, 20 ml, worden verkregen via standard venipunctie gedurende het
reguliere klinische onderzoek zodat geen extra bezoek of punctie noodzakelijk
is. De procedure is gebruikelijk in de praktijk, en leidt tot minimale
belasting en risico voor de patient.