CytoKinen meten in Skin waSvloeistof

Blootstelling aan luchtvervuiling, zoals ozon, koolstofmonoxide, kleine
deeltjes, zwafeldioxide en stikstofdioxide is sterk geassocieerd met het
onstaan van ziekte van onder andere de huid. Ons doel is het karakteriseren van
immuun mediatoren in gezonde en ontstoken huid, om immuun-gerelateerde
biomarkers te identificeren die relevant zijn om te onderzoeken in de context
van luchtvervuiling. Wij stellen voor om een systeem te ontwikkelen om op een
niet-invasieve manier immuun mediatoren in de huid te kunnen meten. Als een
'proof of principle' zullen wij ons eerst richten op 3 pathologische
huidzieketen, atopische dermatitis, een Th2 gedreven ziekte; psoriase, een Th17
gemedieerde conditie en cutane LE, een Th1/interferon gedreven ziekte en ook
gezonde controles. De huidige methoden om biomarkers ind e huid te meten zijn
'tape stripping' en het verzamelen van blaarvloeistof. Beide methoden zijn
invasief en kunnen pijnlijk zijn op aangedane huid. Wij stellen daarom voor om
een nieuw-ontworpen huidwas systeem te gebruiken om op een niet-invasieve
manier immuunmediatoren uit de huid te verzamelen.

Het doel van dit onderzoek is het ontwikkelen van een niet-invasieve manier om
immuunmediatoren uit de huid te verzamelen.
Dit is opgedeeld in 2 delen:
1. Aantonen dat het huid was systeem technisch werkt met behulp van recombinant
eiwit.
2. Het identificeren van biomarkers in de huid van patienten met atopische
dermatitis, psoriase of cutane LE met behulp van ons huid was systeem.

1. Aantonen dat het huid was systeem technisch werkt met behulp van recombinant
eiwit.
Om aan te tonen dat we kandidaat biomarkers succesvol kunnen elueren van de
huid van gezonde vrijwilligers, zullen we een recombinant cytokine-oplossing
(IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-18 en TNFα) aanbrengen op de onderarmhuid van
gezonde vrijwilligers (n=5). De oplossing wordt toegestaan te drogen, voordat
de huidwasser wordt geplaatst: deze wordt met een verstelbare armband aan de
arm bevestigd. Koude PBS/0,05% T-20 met capture beads wordt gedurende 30
minuten toegevoegd en de device wordt afgesloten met een schroefdop. De
wasoplossing wordt na 30 minuten verzameld en geanalyseerd voor de aanwezigheid
van de genoemde cytokines met Luminex-technologie. Alleen als we de recombinant
cytokines succesvol kunnen detecteren, gaan we door naar doelstelling 2.

2. Het identificeren van biomarkers in de huid van patienten met atopische
dermatitis, psoriase of cutane LE met behulp van ons huid was systeem.
We streven ernaar om n=10 gezonde vrijwilligers, n=10 patiënten met atopische
dermatitis, n=10 patiënten met psoriasis en n=10 patiënten met cutane LE te
includeren. Patiënten en gezonde vrijwilligers zullen worden gevraagd om het
huidwasapparaat te dragen op aangedane huid (voor patiënten) en op
niet-aangedane huid (zowel patiënten als gezonde vrijwilligers), om specifieke
patronen van immuunmediator-expressie geassocieerd met AD, psoriasis en CLE aan
te tonen. De device wordt opgbracht en gebruikt zoals hierboven beschreven.
Cytokineniveaus worden bepaald met Luminex-technologie.

Het dragen van de device levert geen risico op. De device is niet invasief en
comfortabel om te dragen, dus de belasting is laag.
Hoewel we dit niet verwachten, kunnen gezonde controles die de recombinant
eiwit op hun arm opgebracht krijgen een milde, voorbijgaande huid irritatie
ervaren. Mocht dit gebeuren, zullen wij dit rapporteren.