De in vitro coagulatie dynamiek van conformatie veranderingen in ADAMTS13

Ernstig gewonde patiënten, die betrokken zijn geweest bij een trauma,
presenteren zich in 40% van de gevallen met een coagulatiesstoornis. Deze
stoornis is nog steeds slecht begrepen, maar bestaat uit een combinatie van
dysfunctionele bloedplaatjes, coagulatiefactor consumptie en versnelde
stolselafbraak genaamd hyperfibrino(geno)lyse. Deze hyperfibrino(geno)lyse
wordt voornamelijk veroorzaakt door te veel plasmine (knipenzym van
fibrine/fibrinogeen), of door een te laag aantal van eiwitten die de conversie
van plasminogeen in plasmine blokkeren. Normaal gesproken gedurende de stolling
heb je geactiveerde bloedplaatjes, von Willebrand Factor, en fibrinogeen nodig
voor eerste stolselvorming. Von willebrand factor wordt normaal gereguleerd
door een enzym genaamd ADAMTS13. Dit enzym knipt multimerisatie van VWF. Data
uit onze onderzoeksgroep suggereert dat in trauma bij bepaalde patienten de
conformatie van ADAMTS13 van gesloten naar constant open is. Deze open
conformatie van ADAMTS13 is liniear gecorreleerd aan de activiteit van
ADAMTS13. Deze patienten hebben ook hyperfibrinolytisch profiel in
coagulatietesten. Om dit beter te begrijpen willen we condities in het lab
nabootsen om zo achter het mechanisme van deze open conformatie ADAMTS13 te
komen. Onze hypothese is dat plasmine, een bepaald sluitingsdomein van ADAMTS13
(CUB1-2), van het enzym afknipt waardoor alleen maar in open conformatie
voorkomt bij deze patiënten. Daarnaast denken we dat open conformatie ADAMTS13
invloed heeft op stollingseiwitten en dynamische stollingstesten, namelijk dat
deze meer richting de hyperfibrinolytische kant gaan.

De doelen van de studie zijn:
1. De rol van ADAMTS13 conformatie op hyperfibrino(geno)lyse onderzoeken in in
vitro coagulatie testen
2. De rol van plasmine op ADAMTS13 conformatie onderzoeken
3. De rol van ADAMTS13 conformatie op in vitro coagulatie flow modellen testen,
ofwel met ofwel zonder endotheliale cellen.

Type studie: gezonde vrijwilligers studie

Bloedafname van 24 gezonde vrijwilligers (leeftijd 18-35) zal worden gebruikt
voor in vitro coagulatie testen. Vrijwillgers zullen worden gescreend of zij
kunnen deelnemen aan de studie. De screening bestaat uit het uitvragen van een
medische voorgeschiedenis en medicatie gebruik. Een gekwalificeerd en
gecertificeerd onderzoeker zal de bloedafname doen. Bloed zal na afname in
verschillende condities worden geïncubeerd.

Er is geen voordeel van deelname aan dit onderzoek. De risico's worden erg laag
geschat, omdat de hoeveelheid van bloedafname (30ml) makkelijk getolereerd kan
worden. Vena puncties hebben milde bijwerkingen, zoals blauwe plekken. Verder
zullen vrijwilligers worden gevraagd naar hun medische voorgeschiedenis en
medicatie gebruik. Al met al is de belasting op de vrijwilligers minimaal. Met
de verkregen resultaten hebben we een beter inzicht in de stollingsafwijkingen
bij trauma en kunnen nieuwe therapieën worden ontwikkeld om deze
stollingsafwijking tegen te gaan.