Doel:Met deze studie willen we aantonen dat ook in de humane situatie NOD2 signalering inderdaad de TLR2-gemedieerde immuunrespons remt.Hiervoor worden humane monocytaire cellen uit perifeer bloed geïsoleerd. Dat NOD2 de TLR2 activering remt, wordt…
ID
Bron
Verkorte titel
Aandoening
- Maagdarmstelselontstekingsaandoeningen
Betreft onderzoek met
Ondersteuning
Onderzoeksproduct en/of interventie
Uitkomstmaten
Primaire uitkomstmaten
Primaire onderzoeksvariabelen zijn de mate van cytokine productie, de mate van
mRNA expressie em de NFkB-activatie van de monocytaire cellen als respons op de
verschillende stimulaties
Secundaire uitkomstmaten
niet van toepassing
Achtergrond van het onderzoek
Rationale:
Mutaties in het CARD15 gen, dat voor NOD2 codeert een intracellulaire receptor
voor bacteriële producten, vormen een risicofactor voor het ontstaan van de
ziekte van Crohn, echter, het mechanisme dat hiervoor verantwoordelijk is, is
nog onbekend. Onlangs is in muizen aangetoond dat gelijktijdige activering van
NOD2 en Toll-like Receptor (TLR)2 leidt tot een minder sterke immuun respons
dan activering van TLR2 alleen.
Hypothese: In Card15-/- deficiënte Crohn patiënten is er een veranderde NOD2
signalering, waardoor er geen remming van TLR2-gemedieerde immuun respons is.
Doel van het onderzoek
Doel:
Met deze studie willen we aantonen dat ook in de humane situatie NOD2
signalering inderdaad de TLR2-gemedieerde immuunrespons remt.
Hiervoor worden humane monocytaire cellen uit perifeer bloed geïsoleerd. Dat
NOD2 de TLR2 activering remt, wordt onderzocht door deze cellen te stimuleren
met TLR2 prikkels al dan niet in aanwezigheid van NOD2 stimulatie. De
immuunrespons wordt gemeten op NF-kB-activerings niveau, op mRNA expressie en
op eiwit expressie van inflammatoire cytokinen.
Onderzoeksopzet
Studie ontwerp:
Procedure:
-Afname van 50 ml veneus bloed in heparine buizen
-Isolatie van monocytaire cellen uit het bloed mbv dichtheidsgradient
-Kweek en stimulatie van de monocytaire cellen
-Verzamelen van supernatanten, isolatie van nucleaire extracten en van het RNA,
hierna vernietiging van resterend humaan materiaal
-Meting van cytokine productie en NF-kB activatie mbv van ELISA, mRNA expressie
mbv qPCR (=eindpunt)
Inschatting van belasting en risico
Bloedafname kan een blauwe plek veroorzaken, en soms wat napijn. Verder zijn er
geen risico*s verbonden aan het onderzoek. Het betreft hier een eenmalige
bloedafname, de belasting voor de deelnemende patienten valt daardoor in te
schatten als 'gering'.
Publiek
Van der Boechorststraat 7
1081BT Amsterdam
Nederland
Wetenschappelijk
Van der Boechorststraat 7
1081BT Amsterdam
Nederland
Landen waar het onderzoek wordt uitgevoerd
Leeftijd
Belangrijkste voorwaarden om deel te mogen nemen (Inclusiecriteria)
patienten met de ziekte van Crohn
ten minste 18 jaar of ouder
bekend NOD2/CARD15 genotype
Belangrijkste redenen om niet deel te kunnen nemen (Exclusiecriteria)
ernstige bloedarmoede
Opzet
Deelname
In onderzoek gebruikte producten en hulpmiddelen
Opgevolgd door onderstaande (mogelijk meer actuele) registratie
Geen registraties gevonden.
Andere (mogelijk minder actuele) registraties in dit register
Geen registraties gevonden.
In overige registers
Register | ID |
---|---|
CCMO | NL11534.029.06 |