Biochemische karakterisering van TSC1 en TSC2 varianten gevonden bij patienten met tubereuze sclerose complex

Na identificatie van TSC1 en TSC2, de genen die bij individuen met tubereuze
sclerose complex (TSC) gemuteerd zijn, hebben we aangetoond dat de TSC1 en TSC2
genprodukten samen een eiwitcomplex vormen. We hebben dit complex
gekarakteriseerd, en we hebben aangetoond dat gen mutaties het complex kunnen
ontwrichten. Daarnaast hebben we mutatie analyse uitgevoerd op een TSC
populatie van >650 indexpatienten.
Bij de meerderheid van die patienten hebben we de pathogene, voor de ziekte
verantwoordelijke, mutatie geidentificeerd, maar in >50 gevallen was het
onmogelijk om op basis van de beschikbare genetische data te beslissen of een
mutatie al dan niet pathogeen zou zijn. Deze veranderingen noemen we
"ongeclassificeerde varianten".
Na de identificatie van de rol van het TSC1-TSC2 eiwitcomplex in het
signaaloverdrachtsproces door mTOR, en de activerende rol van het complex ten
opzichte van de kleine GTPase rheb, hebben we het effect van verschillende
ongeclassificeerde TSC1 en TSC2 varianten op het TSC1-TSC2 eiwitcomplex
bestudeerd. Dit heeft het potentieel van de moleculaire diagnostiek van TSC
uitgebreid.

Onderscheid tussen pathogene, niet-truncerende TSC1 en TSC2 mutaties en
niet-pathogene veranderingen kan worden gemaakt door het bestuderen van hun
invloed op de activiteit van het TSC1-TSC2 eiwitcomplex en op de expressie en
splicing van de TSC1 en TSC2 mRNAs. Functionele karakterisatie van deze
"ongeclassificeerde varianten" zal de huidige diagnostische tests
complementeren. Verbeterde klinische zorg en counselling voor tubereuze
sclerose patienten en hun families zullen dan mogelijk zijn. Onze hypothese is
dat een specifieke klasse van TSC1 en TSC2 mutaties met een mild TSC fenotype
geassocieerd zal worden. Karakterisering van meerdere TSC1 en TSC2 varianten
zal eveneens inzicht geven in de structurele en katalytische domeinen van het
TSC1-TSC2 eiwitcomplex.

Observatie studie

Iedere deelnemer heeft een bloedmonster voor de isolatie van genomische DNA
gegeven als onderdeel van de normale genetische consultatie. TSC1 en TSC2
mutatie screening word uitgevoerd in de Sectie DNA Diagnostiek van de afdeling
klinische genetica bij het Erasmus MC. Deze screening is geen onderdeel van het
onderzoeksproject/protocol. Van ongeveer 20 patienten met een mogelijke mutatie
die de splicing of expressie van de TSC1 of TSC2 genen zou kunnen beinvloeden,
zal een huidbiopt worden gevraagd. De afnamen van een huidbiopt (3 mm) is een
kleine chirurgische ingreep die na lokale verdoving nauwelijks pijn veroorzakt
en slechts een klein litteken achterlaat.
De studie is niet therapeutisch. Het voordeel van de studie is dat de patienten
en hun families betere informatie en duidelijkheid over hun TSC1 en TSC2
mutatiestatus zullen kunnen krijgen.