Stapsgewijze beoordeling van de relatie tussen glycocalyx dimensie, oxidatieve stress en niveau van glycaemie.

Endotheel dysfunctie is een belangrijk kenmerk van de vasculaire complicaties
van diabetes. De vorming van zuurstofradicalen onder invloed van hyperglycaemie
leidt tot endotheel dysfunctie door het aanzetten van vier mechanismen van
weefselschade. Daarnaast heeft de vorming van zuurstofradicalen ook een direct
effect op de endotheliale glycocalyx, een netwerk van membraangebonden
proteoglycanen en glycoproteinen die de vaatwand beschermen. Het is reeds
aangetoond dat patienten met diabetes mellitus meer zuurstofradicalen vormen en
een verminderd glycocalyxvolume hebben in vergelijking met gezonde controles.
Echter, het is onbekend bij welk niveau van glycaemie deze veranderingen
optreden en of deze schade beinvloedt wordt door glycaemische excursies.

Bepalen bij welke bloedglucose het proces van endotheelschade, met als uiting
zuurstofradicaalvorming en glycocalyxschade, begint en of er een glycaemische
drempelwaarde is voor het in gang zetten van deze processen. Voorts het bepalen
of er een directe relatie bestaat tussen zuurstofradicaalvorming en
glycocalyxverlies en daarnaast het onderzoeken van de relatie tussen het niveau
van de bloedglucose en de activatie van stollingsparameters.

Na een screeningsbezoek bestaat de studie uit een stapsgewijze
hyperglycaemische clamp op glucose niveau's van 6, 8 en 10 mmol/l. Elke glucose
concentratie zal constant gehouden worden gedurende 120 minuten. Tijdens ieder
bloedglucose niveau zal elke 30 minuten de vorming van zuurstofradicalen
gemeten worden door bepaling van plasma malondialdehyde en nitrotyrosine en
glycocalyxdikte bepaald worden met behulp van OPS opnamen onder de tong.
Daarnaast zal verlies van delen van de glycocalyx gevolgd worden door middel
van plasmabepalingen van glycocalyxcomponenten. In totaal zal de clamp 420
minuten in beslag nemen. De dag na de clamp zullen de deelnemers naar het AMC
komen voor een vervolgbezoek om opnieuw een glycocalyxmeting en bloedafname te
ondergaan, ter beoordeling van de aanwezigheid van zuurstofradicalen en
glycocalyxcomponenten.

Hyperglycaemische clamp. Door middel van het toedienen van somatostatine, glucose en insuline zal het plasmaglucose stapsgewijs van nuchter naar 6 mmol/l, 8 mmol/l en 10 mmol/l worden verhoogd.

Alle deelnemers zullen het AMC drie keer bezoeken.
Visite 1 (screeningsbezoek): informed consent, voorgeschiedenis, kort
lichamelijk onderzoek, bloedafname (7.5 ml in totaal).
Visite 2: stapsgewijze hyperglycaemische clamp met een totale duur van 420
minuten. Plaatsing van twee infusen, iedere 5 minuten veneuze bloedafname via
het infuus ter bepaling van bloedglucose, iedere 30 minuten veneuze bloedafname
ter bepaling van de vorming van zuurstofradicalen, glycocalyxcomponenten en
stollingsactivatie (294ml in totaal). Somatostatine, glucose en insuline
infusie. OPS opnames onder de tong iedere 30 minuten.
Visite 3: OPS opnames onder de tong en bloedafname (9 ml in totaal).
De belasting bestaat uit drie keer nuchter zijn voor het onderzoek, een periode
liggen tijdens de clamp en het ondergaan van twee bloedafnames en de plaatsing
van twee infusen. Mogelijk treden er bij toediening van somatostatine
misselijkheidsklachten op. Het risico van dit onderzoek is minimaal.