Een longitudinale studie naar het effect van het mexicaanse griep virus op het immuunsysteem

Griep is een virus dat vaak aanzienlijke morbiditeit en mortaliteit veroorzaakt
in de wereldwijde bevolking op jaarbasis. Bovendien is onlangs de pandemische
potentie van het virus geillustreerd tijdens de nieuwe influenza A/H1N1
pandemie. Hoewel er overvloedige kennis is over de opmaak van het
influenza-virus, vele facetten van de respons op dit virus zijn nog steeds
onbekend. Het opdoen van kennis over deze respons zal ons helpen bij de
behandeling van influenza-infecties en leiden tot meer effectieve vaccins.
Daarnaast kan het ook leiden tot de identificatie van individuen die een hoog
risico op morbiditeit en zelfs mortaliteit hebben tijdens infectie.

Lange tijd is gedacht dat B-cellen een sleutelrol vervulden in het tot stand
komen van een goede respons tegen influenzavirus infecties. Onlangs werd
duidelijk dat ook T-cellen een zeer belangrijke rol lijken te spelen in dit
proces. Sinds kort kunnen we door twee technieken te combineren, voor het eerst
inzicht krijgen in flu-specifieke B- en T-cel responsen tijdens infectie op
klonaal niveau. Dit maakt het mogelijk om deze individuele klonen te
identificeren, kwantificeren en fenotyperen.

Toch is het onderzoek van T-cel responsen, maar ook van de B-cel responsen
gehinderd door beperkingen. Vanwege het enorme repertoire van T- en
B-celreceptoren in het menselijk lichaam, is het zeer moeilijk om de
individuele T-en B-cel respons te identificeren en te volgen . Onlangs werd een
nieuwe techniek ontwikkeld binnen onze afdeling die in staat is individuele
klale reacties te identificeren en te volgen zonder enige voorkennis hoe deze
klonen eruit zien. Door het combineren van deze techniek met recent ontwikkelde
in-vitro stimulatie essays, zijn we voor het eerst in staat om klonen die een
functionele rol bij influenza-infecties spelen, te identificeren en te volgen
in de tijd.

Dit project is ingebed in een nieuwe onderzoekslijn die is opgezet in het AMC.
Deze onderzoekslijn is een samenwerking tussen de klinische immunologie en
reumatologie afdeling, het lab van genoomanalyse en meerdere partners in de
immunologie en infectieziekten (zoals prof. dr. R. van Lier / Prof. Dr. I. ten
Berge / Prof.Dr. U. Beuers). Deze studie zal ons niet alleen inzicht geven in
de rol van T-en Bcellen bij virale infectie, maar kan ook leiden ons tot een
beter begrip van de pathologie van infectieziekten (zowel in acute virale
infecties als ook in auto-immuunziekte ).

In deze studie zullen we voor het eerst in-vitro stimulatie essays en high
throughput sequencing combineren om de klonen die een functionele rol spelen
bij influenza-infecties te identificeren, kwantificeren en fenotyperen over de
tijd.
We willen voorheen gezonde vrijwilligers bestuderen die de nieuwe influenza
A/H1N1 virus infectie doormaken. Omdat het zeer waarschijnlijk is dat de H1N1
pandemie terug zal keren in het voorjaar van 2010, verwachten we onze
vrijwilligers te kunnen werven via huisartsenpraktijken in Amsterdam en via de
eerste hulp afdeling van het AMC. Alle vrijwilligers zullen gezien worden in
het AMC.

Dit is een longitudinale studie waarin we het effect van het nieuwe influenza
A/H1N1 virus op de humorale immuunsysteem willen onderzoeken. We zullen op zoek
gaan naar individuele klonale reacties in zowel het T- als ook het B-cel
compartiment en deze over de tijd volgen.

De studie zal bestaan uit acht bezoeken aan het AMC. In het eerste bezoek
zullen de vrijwilligers worden geincludeerd wanneer zij een bevestigde
H1N1-infectie hebben. Dit wordt bevestigd door een routine-test (PCR) in het
AMC. In alle bezoeken zullen we bloed afnemen en klinisch relevante parameters
bijhouden.

Afname schema Hoeveelheid
Doel Tijdspunten
Niet-gehepariniseerd bloed (PAXGene) 2 mL - Repertoire analyse (T/B
cel) Dag 0-4


Dag 7


Dag 14


Dag 28


Dag 56


Dag 84


Dag 112


Dag 140
Gehepariniseerd bloed 70-80 mL - Subset
analyse (T/B cell) Dag 7

- In-vitro stimulatie essays Dag 84

Totale hoeveelheid bloed per individu: 160-180 mL

In totaal zal 160-180mL bloed worden afgenomen.