Het effect van ethanol op de darmwand integriteit gemeten door I-FABP en LBP

Een veel voorkomende bevinding bij trauma patiënten opgenomen op de
spoedeisende hulp met ernstige verwondingen is de aanwezigheid van alcohol
gebruik. Alcohol is betrokken bij 40% van de sterfgevallen als gevolg van auto
ongelukken, 60% van de sterfgevallen als gevolg van opzettelijke verwondingen,
en 50% van de ziekenhuisopnames voor verwondingen.
Chronisch alcoholgebruik leidt tot een afname van de darmwand integriteit in
actief drinkende alcoholisten en patiënten met door alcohol veroorzaakte
leverziekten. Dierstudies tonen aan dat de mucosale schade veroorzaakt door
alcoholgebruik de doorlaatbaarheid van de darm voor macromoleculen doet
toenemen. Dit vergemakkelijkt de translocatie van endotoxinen en andere
bacteriële toxinen uit het darmlumen naar de portale circulatie. Naast
verhoogde endotoxinemie tonen andere studies aan dat de initiële gebeurtenis in
reactie op alcoholgebruik een verhoogde instroom van leukocyten is leidend tot
een verhoogde afgifte van schadelijke mediatoren, zoals reactieve zuurstof
radicalen, leukotriënen en histamine door de mestcellen. Chronisch
alcoholgebruik leidt dus tot een afname van de darmwand integriteit met een
verhoogde endotoxemie en leidt als gevolg daarvan tot een ontstekingsreactie.
Gegevens over de effecten van acute alcoholgebruik op de darmwand integriteit
in niet-alcoholisten is nog schaars.
Bij patiënten die zijn blootgesteld aan een ernstig trauma, word verlies van de
darmwand integriteit als een belangrijke bijdrage gezien aan de ontwikkeling
van excessieve ontsteking. Intestinale mucosale schade ontstaat vroeg na trauma
en leidt tot verlies van de darmwand integriteit en resulteert in translocatie
van luminale bacteriën en giftige stoffen door de darmwand. Dit kan de
inflammatoire response nog verder aanwakkeren. Deze buitensporige ontsteking
kan op zijn beurt leiden tot het systemic inflammatory response syndrome
(SIRS), dat uiteindelijk kan leiden tot multipel orgaanfalen (MOF) en soms de
dood. 20% van de sterfgevallen bij trauma patiënten zijn te wijten aan de
gevolgen van SIRS en MOF.
Wanneer men kijkt naar de effecten van alcohol en ernstig trauma op de darmwand
integriteit en bedenkt dat de twee vaak samen optreden **kan men
veronderstellen dat de uitkomst voor trauma patiënten onder invloed van alcohol
slechter is dan niet geintoxiceerde lotgenoten. Literatuur over dit onderwerp
is spaarzaam, uitsluitend bestaande uit relatief kleine retrospectieve series,
en niet eenduidig.

Het doel van deze studie is het bepalen van de directe effecten van oraal
alcoholgebruik bij gezonde vrijwilligers op de darmwand integriteit (zoals
gemeten aan de hand van Intestinal Fatty Acid Binding Protein - IFABP- en LBP.
Dit zijn eiwitten die vrijwel direct vrijkomen bij darmwandschade resp
translocatie van bacteriele producten zoals LPS.
De darmwand integriteit zal worden beoordeeld met behulp van I-FABP als maat
voor de integriteit van de enterocyt. Lipopolysaccharide bindend eiwit (LBP),
een eiwit dat LPS bindt, zal dienen als een maat voor endotoxemie. L-FABP
(Liver Fatty Acid Binding Protein) zal gebruikt worden als additionele
leverschade markerBovendien is het effect van alcohol op de darmwand
integriteit markers per se beoordeeld door kunstmatig toevoeging van alcohol
het bloed en te vergelijken met niet-alcoholised bloed.

Na informed consent zullen vijftien gezonde volwassen mannelijke vrijwilligers,
van 18-60, zullen deelnemen aan het onderzoek. Vrijwilligers met een medische
voorgeschiedenis van alcoholmisbruik of darmziekte of personen die medicatie
gebruiken worden uitgesloten van de studie. De vrijwilligers worden via een
crossover design gerandomiseerd in 2 groepen: de ene groep drinkt alcohol
volgens protocol, de andere groep drinkt water volgens protocol. Een week later
wordt het onderzoek herhaald waarbij de groepen omgewisseld worden.

Vrijwilligers zullen vasten gedurende 6 uur vóórafgaand aan deelname zodoende
een inschatting te kunnen maken van de alcohol opname. Om uitdroging te
voorkomen of hypoglykemie, zullen vrijwilligers worden toegestaan **om thee,
water of heldere vruchtensap te drinken tot 2 uur vóór de start van de studie.
Bloedafname: van elke vrijwilliger worden twee monsters van het bloed
opgevangen zonder toevoegingen na het afvoeren van de eerste 3 ml bloed
teneinde besmetting te voorkomen. Het eerste monster (S1) van 19 ml bloed wordt
verdeeld in twee helften: 8 ml bloed voor het analyseren van de darmwand
integriteit zonder toevoeging van ethanol, de andere 8 ml zullen worden
geanalyseerd na toevoeging van 10 ul van 96% zuivere ethanol teneinde een bloed
concentratie van 1 * ethanol te verkrijgen. Na de eerste sample zullen 15
vrijwilligers 1g / kg lichaamsgewicht ethanol in wijn (Pinot Noir 12%, 12 g/100
ml) drinken om een **alcoholpromillage van 1* te verkrijgen en twee
vrijwilligers zullen drie 200 ml glazen water drinken. De dranken worden
geconsumeerd in maximaal 45 minuten. Dertig minuten na het laatste glas is
geconsumeerd, zal het tweede monster (S2) van 11 ml bloed worden verzameld. De
volgende vier monsters worden genomen met intervallen van een uur (S3, S4, S5
en S6 respectievelijk). Het laatste monster wordt genomen in een tweede bezoek
om 17.00 uur de dag erna.
In elk monster I-FABP, L-FABP en LBP zal evenals het alcohol promillage gemeten
worden.
De eerste 19 ml bloed (S1) uit de nuchtere deelnemers is verdeeld in twee
helften:
De eerste 8 ml voor het analyseren van het nuchtere bloed en de tweede 8 ml
voor het analyseren van kunstmatig alcoholiseerd bloed.
Na inname van de drank worden 5 afnames van 11ml bloed gedaan met intervallen
van een uur.
Van de 11 ml bloed dat word afgenomen word: 3 ml gebruikt voor het
alcoholgehalte in het bloed
5
ml gebruikt voor I-FABP, L-FABP en LBP
Kunstmatig alcoholised monster:
10 ul 96% ethanol wordt toegevoegd aan 8 ml bloed teneinde een alcoholgehalte
in het bloed van een te verkrijgen 1*
Natuurlijk alcoholised:
8 vrijwilligers drinken 1g / kg ethanol in wijn (12%) = 8,3 ml wijn / kg
(gemiddeld 600 ml per persoon)
Niet alcoholised:
7 vrijwilligers drinken 600ml water

Gezonde mannelijke vrijwilligers (ASA I) tussen de 18 en 60 jaar oud zullen
deelnemen nadat zij informed consent hebben afgegeven. Exclusiecriteria zijn
het gebruik van medicijnen en een medische voorgeschiedenis van alcoholmisbruik
of darmziekte.

Deelnemers consumeren 1 g alcohol per kg lichaamsgewicht. Een bloedmonster van
19 ml, gevolgd door vijf monsters van 11 ml en een van 8ml zal worden
afgenoment tussen 16.45 uur en 17.00 uur de dag erna. De eerste zes afnames
vinden plaats in een enkel bezoek, gevolgd door een afname in kort bezoek de
volgende dag. Het is onwaarschijnlijk dat deelnemers last zullen hebben van
lichamelijke of psychische ongemakken ten gevolge van het afnemen van in totaal
82 ml bloed in 24 uur of de consumptie van de hoeveelheden alcohol of water
hierboven vermeld.