Analyse van de Intestinale microbiota bij kinderen met IBD gemeten met IS-pro

Inflammatoire darmziekten (IBD) omvat een groep van chronische inflammatoire
darmziekten die gekenmerkt wordt door exacerbaties. De belangrijkste twee
aandoeningen binnen deze groep zijn de ziekte van Crohn en colitis ulcerosa.
Zowel genetische- als omgevingsfactoren blijken een belangrijke rol te spelen
in de etiologie. Daarnaast wordt aangenomen dat verstoring in de samenstelling
van de intestinale microbiota een belangrijke rol speelt in de pathogenese.
Analyse van intestinale microbiota tussen volwassenen met actieve IBD en
gezonde controlepersonen heeft evidente verschillen in samenstelling
aangetoond. Tot dusver is echter geen specifiek micro-organisme geidentificeerd
die direct is geassocieerd met het ontwikkelen van IBD.

Bij kinderen met nieuw gediagnosticeerde ziekte van Crohn bestaat
inductietherapie uit 6 weken enterale voedingstherapie met een polymere
voeding. Veranderingen in samenstelling van de microbiota gedurende deze 6
weken zijn beschreven en suggereren een cruciale rol van de darmflora in de
pathogenese. De beschikbare gegevens naar de rol van microbiota bij de
ontwikkeling van IBD op kinderleeftijd zijn echter verre van volledig. De rol
van microbiota bij het ontstaan van IBD moet daarom grotendeels nog worden
opgehelderd.

Recente ontwikkelingen in kweek-onafhankelijke technieken, gebaseerd op analyse
van bacterieel DNA, hebben geleid tot een beter inzicht in de samenstelling van
de intestinale microbiota. Bekende technieken zijn fluorescent in situ
hybridization (FISH), denaturing gel electrophoresis studies (DGE) en real-time
quantitative PCR (qPCR). Deze technieken kennen hun beperkingen, waaronder lage
reproduceerbaarheid, hoge arbeidsintensiteit met als gevolg hoge kosten en een
onvolledig beeld in samenstelling doordat deze afhankelijk zijn van de
gebruikte PCR.
Recentelijk is een hoog-reproduceerbare, gevalideerde techniek ontwikkeld:
IS-pro, gebaseerd op de 16S-23S interspacer (IS) regio (Budding 2010). In deze
studie zal de samenstelling van de intestinale microbiota van kinderen met
nieuw gediagnosticeerde IBDmet behulp van deze nieuwe techniek worden
geanalyseerd.

Primaire doelen:
- beschrijven van de samenstelling van de intestinale microbiota in het beloop
van IBD bij kinderen met behulp van IS-pro
- beschrijven van de samenstelling van de intestinale microbiota van gezonde
kinderen in de leeftijd 4 tot 17 jaar, met behulp van IS-pro

Secundaire doelen:
- Vergelijken samenstelling intestinale microbiota tussen kinderen met actieve
IBD met de gezonde conrolegroep
- Vergelijken samenstelling intestinale microbiota tussen kinderen met actieve
IBD en inactieve IBD (exacerbatie versus remissie)
- Correlatie microbiota mucosa-geassocieerde microbiota en feces-samples ten
tijde van diagnose IBD

Eerste bezoek polikliniek kinder-MDL
Kinderen verdacht van IBD, die voldoen aan de inclusiecriteria, en hun ouders
zullen worden gevraagd te participeren in de studie.

Volgende reguliere polibezoeken (interval volgens routine procedure follow up
IBD)
Ingevuld formulier informed consent in ontvangst nemen
- Bij diagnostische work-up naar IBD op de kinderleeftijd worden tijdens de
routine colonoscopy drie extra mucosa-biopten afgenomen: van ileum, colon
ascendens en sigmoid (10 cm boven rectal verge)
- Patient wordt gevraagd thuis in totaal 6 fecesmonsters te verzamelen,
afgenomen in week 1,3,6,18,26 en 52. Deze dienen thuis in de vriezer te worden
bewaard (bij voorkeur bij -20ºC ) en worden meegebracht bij eerstvolgende
routine poliklinische afspraak. Bij inname in het ziekenhuis worden de
fecesmonsters ingevroren bij -20ºC tot analyse met IS-pro plaatsvindt.

Rouine laboratoriumonderzoek volgens de standaard follow-up van kinderen met
IBD (CRP, volledig bloedbeeld, albumine) wordt verricht bij volgende
polklinische bezoeken (dus er worden geen extra bloedafnames gedaan). Bovendien
wordt in het kader van de follow up van IBD patienten feces calprotectine
bepaald ten tijde van diagnose en 3 maanden na start van de
inductiebehandeling.

Afname van 3 mucosabiopten tijdens de routine endoscopie leidt tot minimale
overschrijding van verwaarloosbaar risico