De etiologie van osteoporose bij reumatoide artritis

Patiënten met reumatoïde artritis leiden niet alleen aan pijnlijke ontstoken
gewrichten en lokaal botverlies rond deze gewrichten maar verliezen ook
botmassa over hun gehele skelet. Dit algemene botverlies is geassocieerd met
een toename van incidentie van wervel en heup-fracturen. Deze fracturen leiden
tot langdurige morbiditeit en zelfs mortaliteit. Cellen rond de ontstoken
gewrichten produceren cytokines en factoren, welke bekend zijn bij te dragen
aan het lokale botverlies. Deze zelfde ontstekingsfactoren zouden tevens kunnen
medieren in het algemene botverlies en zodoende een rol spelen bij het ontstaan
van osteoporose. Deze factoren komen ten slotte in het bloed terecht alwaar ze
ook gemeten kunnen worden

De algemene hypothese is dat circulerende ontstekingsfactoren de belangrijkste
oorzaak zijn voor het ontstaan van gegeneraliseerde osteoporose bij patiënten
met reumatoïde artritis.
Vraagstellingen:
1. heeft het serum van actieve RA patiënten en RA patiënten in remissie, waarin
ontstekingsfactoren zitten, invloed op de vorming, groei en functie van
osteoblasten?
2. Welke pro-inflammatoire mediatoren komen tot expressie in het bloed van RA
patiënten (actief en in remissie)?
3. Hoe beïnvloeden deze pro inflammatoire factoren de osteoblasten in vitro?

Vraagstelling 1 zal beantwoord worden door primaire osteoblasten, afkomstig van
20 gezonde donoren te kweken in aanwezigheid van serum afkomstig van RA
patiënten (aktief en in remissie) en serum afkomstig van gezonde leeftijd en
geslacht gematchte proefpersonen. De primaire botcellen wordt gebruikt als
model voor osteoblasten. Osteoblast proliferatie zal worden gemeten met
proliferatie assays en osteoblast differentiatie naar rijpe osteoblasten en
osteocyten zal worden gemeten als alkalische fosfatase activiteit en met
quantitatieve PCR technieken. Osteoblast functie wordt bepaald door in vitro
botvormings assays.

Voor vraagstelling 2 zal gebruik gemaakt worden van een macro protein array
technique (luminex). Deze techniek zal een groot aantal cytokines tegelijk
meten en een directe vergelijking maken tussen de cytokine profielen van RA
patienten en controles. Door de verkregen profielen van een patient of controle
te associeren met de resultaten van desbetreffend serum bij de celkweek zal
vraagstelling 3 beantwoord worden.

Het risico voor de patienten en controle proefpersonen is nihil. voor de
gezonde donoren is er geen extra risico, bij deze patienten betreft het
uitsluitend overtollig operatie materiaal.