De functionele gevolgen van de 57 kb deletie voor de TRPV1-receptor in cystinose patiënten

Cystinose is een zeldzame autosomale recessieve aandoening, gekarakteriseerd
door de abnormale accumulatie van cystine in de lysosomen. Deze accumulatie
komt voor in bijna alle cellen en weefsels zoals de conjunctiva, cornea, lever,
milt, lymfe knopen, hersenen en nieren. De meest voorkomende en ernstige vorm
is infantiele nefrotische cystinose. Patiënten zijn meesten asymptomatisch bij
geboorte, maar op de leeftijd van 6 maanden presenteren zij zich met
groeiachterstand, overgeven, constipatie, polyurie, abnormale dorst,
dehydratatie en soms rickets. Cystinose wordt meestal veroorzaakt door mutaties
in het cystinosin gen (CTNS). De meestvoorkomende mutatie, aanwezig in ongeveer
50% van de patiënten, is een 57-kb deletie. Deze deletie verwijdert de eerste 9
exonen en een deel van exon 10 van het CTNS gen. Exon 10 van het CTNS gen is
een upstream 5' regio die codeert voor CARKL gen en ook voor de eerste 2
niet-coderende exons van de transient receptor potential channel, vanilloid
subfamily member 1 (TRPV1) gen.
TRPV1 komt vooral tot expressie in zenuwcellen en wordt geactiveerd door hitte
(>43°C) en chemische stimuli. Een van deze chemische stimuli is capsaïcine, de
hoofdingrediënt van chili pepers. De activatie van TRPV1 door capsaïcine
veroorzaakt de vrijzetting van verschillende neuropeptides zoals het calcitonin
gene-related peptide (CGRP). Dit resulteert in een response van de mastcellen,
immuuncellen en gladde spiercelllen waardoor de huid roodheid (door
vasoditatatie) en allodynie (i.e. hypersensitiviteit aan warmte en aanraking)
zal vertonen.

De hypotheses van dit onderzoek zijn de volgende:
1. De dermale doorbloeding in respons op topicaal aangebrachte capsaïcine is
verminderd in cystinose patiënten, vergeleken met controles.
2.De huidgevoeligheid in respons op topicaal aangebrachte capsaïcine is
verminderd in cystinose patiënten, vergeleken met controles.
3.De temperatuursgevoeligheid is verminderd bij cystinose patiënten, vergeleken
met controles.

Het doel van deze studie is om te achterhalen of de deletie van de 2 eerst
niet-coderende exonen van het TRPV1 gen ook gevolgen heeft voor de werking van
de TRPV1-receptor.
Dit zullen we doen door middel van volgende objectieven:
1. Het vergelijken van de dermale doorbloeding in respons op capsaïcine tussen
cystinose patiënten, homozygoot en heterozygoot voor de 57 kb deletie en
controles.
2. Het vergelijken van de huidgevoeligheid na toediening van capsaïcine tussen
cytinose patiënten, homozygoot en heterozygoot voor de 57 kb deletie, en
controles.
3. Het vergelijken van de temperatuursgevoeligheid tussen cystinose patiënten,
homozygoot en heterozygoot voor de 57 kb deletie, en controles.

Dit is een enkel-blinde studie die zal bestaan uit 1 visite van ongeveer 2 uur.
Gedurende deze visite zullen volgende testen uitgevoerd worden:
1. De capsaïcine test.
Tijdens deze test worden 3 rubberen ringetjes aangebracht op de volaire kant
van de onderarm. In de 2 proximale ringetjes wordt een dosis van 1000µg/20µL
(meerderjarigen) of 300µg/20µL (minderjarigen) capsaïcine toegediend. In het
distale ringetje wordt placebo toegediend. Daarna wordt de verandering in
dermale doorbloeding gemten met behulp van Laser Doppler Perfusion Imaging op
baseline (i.e. na 30 minuten acclimatizatie) en op 10,20,30 en 40 minuten na
capsaïcine/placebo applicatie in elke ring.
2. De Von Frey test
Tijdens deze test wordt de huidgevoeligheid getest 40 min na applicatie van
capsaïcine getest met behulp van Von Frey filamenten. Von frey filamenten zijn
gestandariseerde nylondraden van verschillende diktes, die gebruikt worden om
de huidgevoeligheid voor mechanische stimuli te stesten.
3. Temperatuurstest
De temperatuursgevoeligheid zal getest worden door het aanbrengen van gradueel
toenemende en afnemende temperaturen.

-Topicale applicatie van capsaïcine veroorzaakt tijdelijke en lokale roodheid,
jeuk, warmte en hypersensitiviteit van de huid. Dit kan als irriterend ervaren
worden.
-Subjecten kunnen hypersensitiviteit van de huid ervaren tijdens de Von Frey
test en temperatuurstest;