Expressie van cytokeratines en Notch in de gezonde folliculopilosebaceous unit

Hidradenitis suppurativa (HS) is een chronische inflammatoire huidziekte die
voornamelijk
voorkomt op lokaties waar apocriene klieren aanwezig zijn. De pathogenese van
HS is grotendeels onbekend, maar
verschillende studies hebben aangetoond dat de initiërende gebeurtenis
plaatsvindt in de haarfollikel. Histologische studies toonden hyperkeratose van
het infundibulum en epidermale psoriatiforme hyperplasie. Onlangs werd de
Europese S1 richtlijn voor de behandeling van HS gepubliceerd. In deze
richtlijn wordt gesteld dat cytokeratine 17 afwezig blijkt te zijn in
infundibulum like epitheel. Er wordt suggereert dat kwetsbaarheid dit
epitheel, verantwoordelijk is voor de breuk in de haarfollikel. Een andere
recente studie toonde mutaties in genen die coderen voor de transmembraneus
gelegen protease gamma-secretase (GS) bij HS patiënten. GS splitst het
intracellulaire domein van Notch wat leidt tot intracellulaire Notch
signalering. De activatie van Notch signalering leidt tot cellulaire groeistop
en het begin van differentiatie. Bij muizen werd aangetoond dat deficiënte
Notch signalering leidt tot occlusie van haarzakjes, vorming van epidermale
cysten en onvoldoende feedback onderdrukking van aangeboren immuniteit. In
psoriasis, werd de hypothese gesteld dat afname van Notch moleculen via
afwijkende expressie van cytokeratine 10 en de cytokeratine 14 leidt tot
abnormale differentiatie van de epidermis. Onze hypothese is dat zowel
cytokeratines en Notch betrokken zijn bij de pathogenese van HS. Notch zou
verantwoordelijk kunnen zijn voor de verstoorde expressie van cytokeratinen in
de folliculopilosebaceous unit (FPSU) van HS. De precieze expressie van Notch
en cytokeratins bij gezonde FPSUs onbekend. In toekomstige projecten willen we
de expressie van cytokeratines en Notch in FPSUs van HS patiënten onderzoeken.
Om dit te kunnen doen, is het eerst nodig om deze eiwitten in gezonde
menselijke FPSUs te onderzoeken.

1) de expressie van cytokeratinen en Notch in de verschillende segmenten van
gezonde FPSUs onderzoeken.
2) de associatie tussen expressie van het cytokeratines en Notch 1 beschrijven
in FPSUs van gezonde vrijwilligers.

Design: observationele studie
Studieduur: vier maanden
Omgeving: afdeling Dermatologie van het Universitair Medisch Centrum Groningen
Procedure:
Gezonde vrijwilligers: de huid monsters van 20 gezonde vrijwilligers zullen
worden geanalyseerd. Een totaal van 20 biopten zullen worden afgenomen; 10
huidmonsters van de oksel regio en 10 huidmonsters van de lies.
Verzamelen huid monsters: vier milimeter (mm) punch biopten worden genomen,
hetzij uit de oksel of de lies onder plaatselijke verdoving. Het biopt zal in
de richting van de haar worden genomen om de kans op het verkrijgen van de
volledige PFSU in het biopt te optimaliseren.
Kleuringen: Een hematoxyline en eosine (HE) kleuring wordt uitgevoerd om de
aanwezigheid van de verschillende segmenten van de FPSU te evalueren. Alleen
als alle segmenten aanwezig zijn, kan de expressie van de verschillende
eiwitten onderzocht worden. Uit eerdere studies leerden wij dat de kans op een
volledige FPSU in een biopsie ongeveer 50% is. Helaas is er geen methode
beschikbaar die de kans op het verkrijgen van een complete FPSU verhoogt. Omdat
we 10 biopten willen onderzoeken, vragen we toestemming van het afnemen van 20
biopten. DIF wordt uitgevoerd op de biopten die alle segmenten van de FPSU
hebben. Cytokeratine 1,5, 10,14, 15, 16, 17 en 19 en Notch 1 zal worden
gekleurd.
Scoring: Image J wordt gebruikt om de intensiteit van de IF kleuring (per
segment) te analyseren .
Evaluatie van de eindpunten:
Primair eindpunt: de intensiteit van de kleuringen van de verschillende
eiwitten in de verschillende segmenten van de FPSU
Secundair eindpunt: de associatie tussen de intensiteit van de verschillende
cytokeratines en Notch 1 in de FPSUs

De lasten en risico's zijn verwaarloosbaar.
Punch biopten zijn onderdeel van de dagelijkse praktijk bij de afdeling
Dermatologie en leiden zelden
tot complicaties, zoals wondinfectie. De procedure duurt ongeveer 5-10
minuten en er zijn geen verdere bezoeken nodig, behalve voor het verwijderen
van de hechting (duurt
ongeveer 2 minuten).