Genen betrokken bij de inductie en resolutie van eczeem waarbij we gebruik maken van de Atopie Plak Proef als een in vivo model voor constitutioneel eczeem

Constitutioneel eczeem (CE) is een chronische inflammatoire huidaandoening,
meestal gekenmerkt door hoge serum IgE spiegels en infiltratie van de huid met
immuuncellen in zowel lesionale als niet-lesionale huid. De aanwezigheid van
immuuncellen in de niet-lesionale huid maakt deze immunlogisch
'gepre-activeerd' in vergelijking tot de gezonde controle huid. De reactie op
lichaamsvreemde antigenen zal hierdoor mogelijk sneller optreden waardoor
patiënten eczeem kunnen ontwikkelen. Er is echter weinig bekend over welke
factoren en daarmee verbonden intracellulaire pathways betrokken zijn bij de
inductie en resolutie van constitutioneel eczeem.

De APT is een humaan in vivo model voor de inductie en resolutie van eczeem bij
CE patiënten. Tijdens de APT wordt een allergeen (bv huisstofmijt) gedurende
24-48-72-96 uur op de huid geplakt, resulterend in een eczemateuze reactie,
vergelijkbaar met constitutioneel eczeem. De APT kan een zeer geschikte methode
zijn om factoren te ontdekken die een rol spelen bij de inductie en resolutie
van constitutioneel eczeem. Het 24 uurs tijdstip is gekozen om vroege
inductiemarkers te detecteren en het 48 uurs tijdstip is gekozen om te kijken
welke factoren langer verhoogd tot expressie komen of welke factoren inmiddels
een daling tav 24 uur laten zien. Het 72 en 96 uurs tijdstip is gekozen om te
kijken welke markers een rol spelen bij het uitdoven van de eczeemreactie. Uit
qPCR data van het vorige pilot onderzoek kwamen verschillende markers als
'targets' naar voren die een rol kunnen spelen bij de inductie en resolutie van
constitutioneel eczeem (zie bijlage). Met deze studie willen een uitspraak met
meer precisie doen over deze markers nav een sample size calculatie waaruit
bleek dat we voor een uitspraak met meer precisie (rekening houdend met
multiple testing) nog 10 patienten voor het onderzoek moeten includeren. Daarom
wij vragen aan de METC om het onderzoek met n=10 uit te breiden. Deze
additionele studie zal meer inzicht geven in de inductie en resolutie van
constitutioneel eczeem in humaan weefsel en zo ook als basis kunnen dienen voor
eventuele therapeutische targets.

PS: er is specifiek voor extra biopten op 72 en (zoals terecht gesuggereerd
door de METC) 96 uur gekozen omdat we dan beter de resolutie van het
geïnduceerde eczeem kunnen bekijken op genexpressieniveau. Daarnaast duurt het
omzetten van expressie van genen in eiwit een aantal uren. Met andere woorden:
de 72-96 uurs biopten weerspiegelen beter de eiwitten van de gemeten genen dan
de 48 uurs biopten die op dat moment hoge genexpressie laten zien (hetzelfde
geldt als men 48 uurs biopten vergelijkt met 24 uurs biopten voor eiwit).

Deze studie heeft als doel het bestuderen van factoren betrokken bij de
inductie en resolutie van constitutioneel eczeem. Deze factoren zijn mogelijk
nieuwe therapeutische targets voor de behandeling van CE.

Studie met APT voor n=10 proefpersonen
- De APT wordt aangebracht en er worden biopten genomen van het 24-48-72-96
uurs geïnduceerd eczeem. Tevens worden er biopten genomen van de
niet-laesionale, laesionale huid en wordt er een controle biopt uit petrolatum
(vaseline) geplakte huidgebieden afgenomen.
- Diverse inductie en resolutie markers zullen gemeten worden middels qPCR in
het biopt materiaal. Lokalisatie van de markers zullen middels IHC worden
verricht op het verkregen materiaal.

Deelnemers zullen een huidplakproef (APT) en 7 huidbiopten - (4 mm doorsnede)
in 5 sessies ondergaan. Het nemen van een huidbiopt van 4 mm van de huid gaat
gepaard met een minimaal medisch risico en de belasting voor de patiënt is
beperkt. Er is een hele kleine kans op een bacteriële infectie van de
biopsieplaats. Echter, jarenlange klinische ervaring en ervaringen met de
biobanken *eczeem* en *huid* hebben laten zien dat er geen SAE's zijn
opgetreden. Voorts houdt de patiënt een maximaal 4 mm groot, wit, vlak litteken
over. Met het oog op het mogelijk achterblijven van kleine littekens zullen er
geen biopten afgenomen worden van het gelaat, de nek, hals en het coeur. De
biopten zullen alleen afgenomen worden van armen, benen (daar bevindt zich
doorgaans aangedane huid) of romp (daar bevindt zich doorgaans niet-aangedane
huid).

Het aangegeven aantal biopten is nodig om de vereiste controles uit te kunnen
voeren. Het 24 uurs tijdstip is gekozen om vroege inductiemarkers te detecteren
en het 48 uurs tijdstip is gekozen om te kijken welke factoren langer verhoogd
tot expressie komen of welke factoren inmiddels een daling tav 24 uur laten
zien. Het 72 en 96 uurs tijdstip is gekozen om te kijken welke markers een rol
spelen bij het uitdoven van de eczeemreactie. De aangegeven hoeveelheid
materiaal is nodig om de beschreven analyses uit te kunnen voeren. Er is geen
direct voordeel voor de deelnemers. Het afnemen van een huidbiopt brengt een
beperkt risico op bloeding en infectie met zich mee. Een klein litteken zal
achterblijven op de plaats waar het biopt is afgenomen. Het kleurverschil
tussen huid en litteken zal geleidelijk afnemen. Een huidplakproef zal erytheem
en jeuk induceren met soms papels en kleine vesikels. De reactie verdwijnt na
72-96 uur. Patiënten kunnen corticosteroïden op de huid smeren om deze reactie
sneller te laten verdwijnen.