Moleculair onderzoek naar verminderde ovarieele reserve en embryo kwaliteit bij BRCA1/2 mutatie draagsters

Eerder is aangetoond dat vrouwen met een BRCA1-mutatie minder rijpe eicellen
produceren wanneer ze hormonaal gestimuleerd worden in vergelijking met vrouwen
die de mutatie niet dragen. Muizen met een Brca1-mutatie hebben ook minder
primordiale follikels in hun eierstokken en deze eicellen en het omliggende
weefsel vertoont ook meer DNA schade. Daarnaast is er ook aangetoond dat bij
Brca1-mutante embryo*s meer numerieke en structurele chromosomale afwijkingen
gevormd worden na bloostelling aan γ-straling in vergelijking wild-type en
heterozygote embryo*s van eenzelfde moeder. Deze resultaten suggereren dat
vrouwen met een BRCA1-mutatie, die in vitro fertilisatie (IVF) ondergaan, al
dan niet gevolgd door pre-implantatie genetische diagnose (PGD) ter voorkoming
van de overdracht van hun mutatie aan hun nakomelingen, een verminderde kans
hebben op een succesvolle IVF(/PGD) procedure. Deze resultaten suggereren ook
dat de kwaliteit van de embryo*s van vrouwen met een BRCA1-mutatie verminderd
zou zijn. Echter op dit moment is het mechanisme achter deze klinische
observaties nog niet duidelijk. Wij veranderstellen dat een verminderde
ovariële reserve het gevolg is van een toename in DNA schade in de eicellen dat
leidt tot een toename in geprogrammeerde celdood (apoptose) en chromosomale
instabiliteit induceert. Dit is aannemelijk aangezien BRCA1 en BRCA2 eiwitten
een belangrijke rol spelen in de herstel van DNA schade.

Met dit onderzoek willen wij de associatie tussen BRCA1/2-mutaties, DNA schade,
apoptose en eicel/embryo kwaliteit onderzoeken, gebruikmakende van ongerijpte
germinal vesicle dragende eicellen (GV), ongerijpte metafase 1 eicellen (MI),
gerijpte niet-bevruchte metafase 2 eicellen (MII) en mutatie dragende embryo*s
uit de vroege-ontwikkelingsfase van BRCA1/2-mutatie draagsters in vergelijking
de controle groep.

Prospectieve cohort studie.
Voor deze studie zullen (on)gerijpte eicellen en embryo*s verzameld worden van
vrouwen die IVF/PGD ondergaan. Er zal enkel gebruik gemaakt worden van
restmateriaal, nl. GV, MI, onbevruchte MII eicellen en embryo*s met een
BRCA1/2-mutatie of met een andere genetische aandoening, zoals gediagnosticeerd
door PGD. Om de kwaliteit van de eicellen en embryo*s te bepalen zal er gekeken
worden naar hun morfologie tijdens de IVF/PGD procedure. Aan de hand van
immunocytochemische kleuringen van het verzameld materiaal zal gekeken worden
naar DNA schade en apoptose. SNP arrays zullen gebruikt worden om gehele
genomen te testen op structurele en numerieke chromosomale afwijkingen en te
achterhalen of deze afkomstig zijn van de moeder of vader.

Deelname aan de studie zal niet gepaard gaan met enig risico of extra belasting
voor de patiënt. Voor deze studie zijn geen extra bezoeken, fysieke onderzoeken
of andere testen, bloed monsters of ander biologisch materiaal nodig, anders
dan welke reeds nodig zijn voor de IVF/PGD procedure die de vrouwen ondergaan.
Deelname heeft geen effect op de IVF-behandeling van de patiënt op welke manier
dan ook, tevens zal het onderzoek geen toegevoegde waarde hebben voor de
patiënt in dit stadium van de studie.