Validatie van specifieke biomarkers voor de diagnose van endometriose.

1. Context en huidige kennis
1.1. endometriose
Endometriose is een belangrijke en slopende gynaecologische aandoening die 10%
van alle vrouwen in de reproductieve leeftijd treft, waarbij wereldwijd
ongeveer 180 miljoen patiënten betrokken zijn. Ziektediagnose komt meestal meer
dan negen jaar na manifestatie van de ziekte voor, vanwege niet-specifieke
symptomen, ernstige chronische bekkenpijn en onvruchtbaarheid (bij 40% van de
patiënten met endometriose), en ook door invasieve diagnose door chirurgie.
Dit is een slopende en kostbare ziekte, die 78 miljard euro kost in de grote
Europese landen en 79 miljard dollar in de Verenigde Staten elk jaar.

1.2. Etiologie en classificatie
Endometriose wordt veroorzaakt door weefsel dat de binnenkant van de baarmoeder
bekleedt en zich buiten de baarmoeder ontwikkelt, in de buikholte, resulterend
in laesies en / of verklevingen in gekoloniseerde organen en / of cysten van de
eierstokken en soms inwerking op de hersenen en de longen.
Onder de drie belangrijkste etiologische hypothesen voor endometriose zijn: (i)
retrograde menstruatie, (ii) embryogenese en (iii) in situ ontwikkeling van
endometriose laesies. De overheersende hypothese is retrograde stroom van
endometriale cellen naar de buikholte tijdens de menstruatie.
Endometriose is een complexe ziekte, met heterogene laesies als gevolg van hun
lokalisatie (peritoneale, diepe en / of ovariële) of hun kleur (rood, wit,
zwart, rood en zwart, enz.). De mate van ziekte varieert sterk tussen
patiënten. Sommige patiënten hebben enkele kleine laesies, terwijl andere grote
ovarium endometriose cysten (endometriomas) en / of uitgebreide fibrose en
verklevingen hebben in verschillende maten van ernst, leidend tot significante
anatomische veranderingen in het bekkengebied.

De belangrijkste classificatie voor endometriose, van de American Fertility
Society, herzien in 1985, wordt gebruikt door chirurgen om de ernst van elke
graad van endometriose per stadium te classificeren. Deze classificatie is
gebaseerd op intraoperatieve observatie van endometriose-implantaties in het
peritoneum en / of ovariumgebied. Het stadium van de endometriose hangt af van
de omvang en diepte. Verklevingen zijn ook opgenomen in de score, die hun
dichtheid in aanmerking neemt.
1. Fase I komt overeen met rAFS-score van 1 tot 5.
2. Fase II komt overeen met de RAFS-score van 6 tot 15.
3. Fase III komt overeen met de RAFS-score van 16 tot 40.
4. Stadium IV komt overeen met de RAFS-score hoger dan 40.
Het is echter belangrijk om te begrijpen dat deze classificatie geen rekening
houdt met de progressieve aard van de ziekte en geen voorspellende of
prognostische waarde heeft. Inderdaad, sommige kleine anatomische vormen zijn
zeer agressief in termen van onvruchtbaarheid, inefficiëntie van medicamenteuze
behandeling en persistentie / recidief ondanks chirurgie. Daarentegen zijn
sommige geavanceerde vormen volgens de classificatie (bijvoorbeeld grote
cysten) eenvoudig toegankelijk door laparoscopie en komen niet terug.

1.3. Endometriose symptomen en impact
Patiënten met endometriose presenteren zich met ernstige, chronische pijn
(menstruele krampen, dysmenorroe), invaliderende, vaak ondraaglijke pijn, vaak
in de onderrug, het bekken en de buik, pijnlijk urineren en onregelmatige en
buitensporige menstruatie, en onvruchtbaarheid bij meer dan 40% van de
patiënten .
Endometriose verstoort het dagelijks leven van patiënten, hun sociale en
professionele leven en bijgevolg hun fysieke en emotionele welzijn. De ziekte
beïnvloedt ook de kwaliteit van hun leven als gevolg van chronische bekkenpijn,
meervoudige operaties en hormonale behandelingen of IVF-cycli die gedoemd zijn
te mislukken.
Endometriose wordt ook gekenmerkt door een hoge recidiefratio: 50% binnen twee
jaar na de operatie.
Ondanks de hoge incidentie en prevalentie, wordt endometriose gediagnosticeerd
met een gemiddelde vertraging van negen jaar, gedurende welke periode de ziekte
voortgaat. De maatschappelijke kosten van endometriose bedragen 79 miljard
dollar in de VS en 78 miljard euro in de belangrijkste Europese landen per
jaar. Deze kosten zijn vergelijkbaar met de kosten van andere ziekten;
bijvoorbeeld type II diabetes of de ziekte van Crohn. In Frankrijk bedragen de
jaarlijkse kosten van endometriose ongeveer 21.000 euro per patiënt.

1.4. Huidige diagnose en behandeling van endometriose
Endometriose kan worden vermoed tijdens het klinische onderzoek, gecombineerd
met beeldvormingstechnieken, zoals echografie en MRI. Deze technieken worden
echter alleen in de eerste regel gebruikt vanwege hun aanzienlijke beperkingen
(afhankelijk van de operator en niet-specifiek). De gouden standaard voor
endometriose-diagnose is laparoscopie onder algemene anesthesie, om een ??
endometriotische laesie-verwijdering en weefselanalyse door een patholoog uit
te voeren. De diagnostische interventie is ook therapeutisch. Over het algemeen
wordt de diagnose gesteld wanneer pijn ondraaglijk is voor de patiënt en / of
wanneer de buikholte massaal wordt binnengevallen in ernstige vormen van de
ziekte.


Despite these alarming key facts, there is no definitive treatment. The
American Society for Reproductive Medicine (ASRM), describes endometriosis as a
chronic disease requiring medical monitoring throughout a patient’s life. This
active monitoring helps to avoid multiple surgical interventions in favour of
hormonal treatment. Unfortunately, these treatments are not specific, have
limited efficacy and are often associated with irreversible side effects (loss
of bone density, virilization, acne, depressive disorder, etc.). Any recurrence
of debilitating chronic pain is evidence of the recurrence of endometriosis.

In more detail, therapeutic options combine surgical and medical treatments.
Conservative surgery is an option frequently used:
• Operative laparoscopy (most frequent treatment). Some patients require over
ten surgical procedures. These surgeries are often extreme and radical with
organ ablation (bladder, terminal colon, hysterectomy, ovariectomy), and a
greater risk of significant complications and morbidity. The chances of
conception after a second surgery are two times less than after a first surgery
because of decreased ovarian reserve.
• Hysterectomy with ovariectomy and excision of all the lesions in situ to
prevent any risk of recurrence (often the “last resort” procedure).
Endometriosis drug therapies most commonly used:
• Non-steroidal anti-inflammatory drugs to relieve pain.
• Hormonal treatments to block the gonadotropic axis and inhibit lesion growth.

These hormonal treatments include:
• Progestogens and combined oral contraceptives (COC)
• LH-RH agonists. This treatment cannot be prescribed for more than one year
because of significant adverse effects (loss of bone density)
• Danazol (serious virilization side effects)
To improve management of the endometriosis patient, it is essential to:
- Diagnose the disease earlier with a non-invasive and reliable method;
- Monitor the patient and her disease to assess treatment efficacy and early
detection of recurrence;

This will allow detection, from the first symptoms, of women with
endometriosis, and avoid therapeutic wandering and multiple visits and
unsuitable treatments. The objective is also to improve individual patient
monitoring to prevent recurrence and multiple surgeries. Finally, the
preservation of fertility and the possibility of procreation are also a major
challenge.

2. General description of the research
The study described in this protocol deals exclusively with specific biomarkers
in the endometrium and in the blood in order to validate the analytical
specificity and sensitivity of endometriosis biomarkers in view of:
- early diagnosis of endometriosis;
- prognosis of disease recurrence for patients with endometriosis.

Endodiag will analyse several biomarkers using ImmunoHistoChemistry (IHC) and
molecular biology techniques on human samples collected by investigators. These
results, in correlation with clinical data from patients, will confirm the
diagnostic and prognostic potential of the identified biomarkers in relation to
endometriosis.

3. Summary of preclinical and clinical data
This project of, 1) diagnosis of endometriosis based on endometrial and/or
blood samples and, 2) prognosis regarding disease recurrence, has already been
investigated during a retrospective study on human samples in the context of
which we have already obtained an authorization from the French Ministry of
Higher Education and Research (date 02/12/2013, ref. No. DC-2013-1878) to store
and prepare human samples for research purposes (named CODECOH).

3.1. Diagnosis from blood sample
Gold standard for the diagnosis of endometiosis is laparoscopy surgery, also
allowing to treat by excision the visible endometriosis lesions. Currently, no
signature of circulating biomarkers to diagnose endometriosis has been
validated. Several research teams, including Endodiag, have studied the
potential role of microRNAs in the development of the disease, because they
have been described as regulating the expression of genes identified as
implicated in the pathogenesis of endometriosis.
A study carried out on 51 serum samples (36 patients and 15 controls) allowed
the identification of microRNAs of interest after clustering, some being low
expressed (8) and others overexpressed (4) in patients. These biomarkers have
been described as intervening in cellular functions potentially related to the
ethiopathology of endometriosis (embryology, cell cycle, DNA replication,
chromatic architecture, intracellular signalling, proteolysis and vesicular
transport ...). These results have been patented.
Endodiag licensed the patent from this comparative study of blood samples from
patients (aged 18-45 years) followed for endometriosis and controls (who had
laparoscopic surgery for other indications and during which absence of
endometriosis has been validated). Proteomic analyses and circulating
biomarkers research allowed to identify microRNAs expressed differentially betwe
5000/5000
Nombre maximal de caractères : 5000
Ondanks deze alarmerende feiten, is er geen definitieve behandeling. De
American Society for Reproductive Medicine (ASRM) beschrijft endometriose als
een chronische ziekte die medische controle vereist gedurende het leven van een
patiënt. Deze actieve monitoring helpt om meerdere chirurgische ingrepen ten
gunste van hormonale behandeling te voorkomen. Helaas zijn deze behandelingen
niet specifiek, hebben ze een beperkte werkzaamheid en gaan ze vaak gepaard met
onomkeerbare bijwerkingen (verlies van botdichtheid, virilisatie, acne,
depressieve stoornis, enz.). Elke herhaling van slopende chronische pijn is het
bewijs van het terugkeren van endometriose.

Meer in het bijzonder combineren therapeutische opties chirurgische en medische
behandelingen.
Conservatieve chirurgie is een vaak gebruikte optie:
• Operatieve laparoscopie (meest voorkomende behandeling). Sommige patiënten
hebben meer dan tien chirurgische ingrepen nodig. Deze operaties zijn vaak
extreem en radicaal met orgaanablatie (blaas, terminale colon, hysterectomie,
ovariëctomie) en een groter risico op significante complicaties en morbiditeit.
De kans op conceptie na een tweede operatie is twee keer minder dan na een
eerste operatie vanwege een verminderde ovariële reserve.
• Hysterectomie met ovariëctomie en excisie van alle letsels in situ om
herhaling te voorkomen (vaak de "laatste redmiddel" -procedure).
Medicijnen voor endometriose worden het meest gebruikt:
• Niet-steroïde anti-inflammatoire geneesmiddelen om pijn te verlichten.
• Hormonale behandelingen om de gonadotrope as te blokkeren en de groei van
laesies te remmen.

Deze hormonale behandelingen omvatten:
• Progestogenen en gecombineerde orale anticonceptiva (COC)
• LH-RH-agonisten. Deze behandeling kan niet langer dan een jaar worden
voorgeschreven vanwege significante nadelige effecten (verlies van botdichtheid)
• Danazol (ernstige bijwerkingen door virilisatie)
Om het management van de endometriose-patiënt te verbeteren, is het essentieel
om:
- Diagnose van de ziekte eerder met een niet-invasieve en betrouwbare methode;
- Monitor de patiënt en haar ziekte om de werkzaamheid van de behandeling en de
vroege detectie van een recidief te beoordelen;

Dit maakt detectie vanaf de eerste symptomen van vrouwen met endometriose
mogelijk en vermijdt therapeutische zwervende en meervoudige bezoeken en
ongeschikte behandelingen. Het doel is ook de individuele patiëntbewaking te
verbeteren om herhaling en meerdere operaties te voorkomen. Tot slot, het
behoud van de vruchtbaarheid en de mogelijkheid van voortplanting zijn ook een
grote uitdaging.

2. Algemene beschrijving van het onderzoek
De studie beschreven in dit protocol heeft uitsluitend betrekking op specifieke
biomarkers in het endometrium en in het bloed om de analytische specificiteit
en gevoeligheid van endometriose biomarkers te valideren met het oog op:
- vroege diagnose van endometriose;
- prognose van terugkeer van de ziekte bij patiënten met endometriose.

Endodiag zal verschillende biomarkers analyseren met behulp van
ImmunoHistoChemistry (IHC) en technieken voor moleculaire biologie op
menselijke monsters verzameld door onderzoekers. Deze resultaten, in samenhang
met klinische gegevens van patiënten, zullen het diagnostische en prognostische
potentieel van de geïdentificeerde biomarkers met betrekking tot endometriose
bevestigen.

3. Samenvatting van preklinische en klinische gegevens
Dit project van, 1) diagnose van endometriose op basis van endometriale en / of
bloedmonsters en, 2) prognose met betrekking tot terugkeer van de ziekte, is
reeds onderzocht tijdens een retrospectieve studie van menselijke monsters in
de context waarvan we al een autorisatie verkregen hebben van de Frans
Ministerie van Hoger Onderwijs en Onderzoek (datum 02/12/2013, ref. Nr.
DC-2013-1878) voor opslag en voorbereiding van menselijke monsters voor
onderzoeksdoeleinden (CODECOH genaamd).

3.1. Diagnose van bloedmonster
De gouden standaard voor de diagnose van endometiose is een laparoscopische
operatie, waarbij ook de zichtbare endometriose-laesies door excisie kunnen
worden behandeld. Momenteel is geen handtekening van circulerende biomarkers
voor de diagnose van endometriose gevalideerd. Verschillende onderzoeksteams,
waaronder Endodiag, hebben de mogelijke rol van microRNA's in de ontwikkeling
van de ziekte bestudeerd, omdat ze zijn beschreven als regulerend voor de
expressie van genen waarvan is vastgesteld dat ze betrokken zijn bij de
pathogenese van endometriose.
Een studie uitgevoerd op 51 serummonsters (36 patiënten en 15 controles) maakte
de identificatie van microRNA's van belang na clustering mogelijk, waarvan
sommige laag tot expressie werden gebracht (8) en anderen tot overexpressie
werden gebracht (4) bij patiënten. Deze biomarkers zijn beschreven als
interventies in cellulaire functies die mogelijk gerelateerd zijn aan de
ethiopathologie van endometriose (embryologie, celcyclus, DNA-replicatie,
chromatische architectuur, intracellulaire signalering, proteolyse en transport
van blaasjes ...). Deze resultaten zijn gepatenteerd.Endodiag heeft het patent
in licentie gegeven van deze vergelijkende studie van bloedmonsters van
patiënten (in de leeftijd van 18-45 jaar) gevolgd voor endometriose en
controles (die laparoscopische chirurgie hadden voor andere indicaties en
waarbij de afwezigheid van endometriose is gevalideerd). Proteomische analyses
en circulerend biomarkersonderzoek liet toe om microRNA's te identificeren die
differentieel tot expressie werden gebracht tussen de twee groepen (patiënten
versus controles).
Een retrospectief valideringsonderzoek met 60 serummonsters, verzameld tijdens
het eerste onderzoek en uitgevoerd in Endodiag-laboratoria, valideerde de
prestaties van de goedgekeurde handtekening (gevoeligheid 90%, specificiteit
87%, PPV 88% en NPV 90%). De analytische validatie van deze handtekening zal
worden uitgevoerd binnen het kader van dit protocol en moet resulteren in de
definitie van een diagnostische kit, die zelf klinisch zal worden gevalideerd
in een tweede onderzoek.

3.2. Endometriose-diagnose van endometriumbiopsie
Verschillende publicaties hebben aangetoond dat er biologische verschillen zijn
tussen endometrium endometriose en een gezond endometrium. Deze informatie
biedt het perspectief voor niet-invasieve diagnose van endometriummonsters. We
hebben ons eigen onderzoeksprogramma op endometriose-specifieke endometriale
biomarkers uitgevoerd en we hebben een 8 biomerker-handtekening geïdentificeerd
met hoge specificiteit en gevoeligheid voor endometriose-diagnose. De huidige
prestaties van onze biomerkerhandtekeningen zijn: gevoeligheid 95%,
specificiteit 88%, PPV 85% en NPV 95%.
• Ontdekking van biomarkers: Endodiag is gebaseerd op 20 jaar
endometrioseonderzoek uitgevoerd door de twee oprichters om een ??eerste panel
van 35 biomarkers te identificeren. Ze behoren tot signaleringsroutes:
angiogenese, immuun- en inflammatoir systeem, hormonale, migratie, proliferatie
en stamcellen.
• Kwalificatie van de geïdentificeerde biomarkers in 2015: deze 35 biomarkers
werden bestudeerd in een eerste retrospectieve studie van 55 endometriale
biopsieën ingebed in paraffine. IHC-analyse werd uitgevoerd en de correlatie
tussen biomarkers-expressie en resultaten van diagnose door laparoscopie werd
onderzocht. Deze studie valideerde de analytische methode, IHC, als robuust en
betrouwbaar. Vervolgens valideerden we de geïdentificeerde biomarkers voor
diagnostische doeleinden.
• Verificatie van de biomarkers in 2016: op basis van de eerdere
studieresultaten hebben we een prospectieve studie uitgevoerd bij 80 patiënten
die werden behandeld in 3 klinische centra (Saint Louis, Verenigde Staten,
Fribourg, Zwitserland en Parijs, Frankrijk) om de diagnostische waarde van
biomarkers te valideren. De analyse keek naar de correlatie tussen expressie
van biomarkers en laparoscopische diagnose. De resultaten werden geanalyseerd
door een externe datamining- en biostatistische dienstverlener om de meest
relevante biomarkercombinatie te identificeren en om patiënten te scheiden van
controles binnen een heterogene populatie met hoge sensitiviteit en
specificiteit.

Deze combinatie van 8 biomarkers is geassocieerd met een
interpretatie-algoritme om patiënten te onderscheiden van controles en
endometriose te diagnosticeren met zekerheid met behulp van een endometriaal
monster.
De validatiestudie die in dit protocol wordt voorgesteld, zal de
geïdentificeerde biomarkers analytisch valideren. Het uiteindelijke doel is om
een ??niet-invasieve diagnostische kit te ontwikkelen.

De huidige prestaties van biomerkerhandtekeningen voor niet-invasieve diagnose,
op basis van endometrium- en bloedmonsters in combinatie met een algoritme,
zijn de volgende (bepaald tijdens eerdere studies):
Gevoeligheids
specificiteit PPV NPV
EndoSearch endometrium 95% 88%
85% 95%
EndoSearch bloed 90%
87% 88% 90%

Het doel van deze studie is om ten minste de volgende prestaties te verkrijgen
in een groot cohort:
Gevoeligheids
specificiteit PPV NPV
EndoSearch endometrium 85% 85%
85% 85%
EndoSearch-bloed 85%
85% 85% 85%

1. Studietype
Deze studie is een multicenter, internationaal, prospectief, open-label
onderzoek, uitgevoerd op twee patiëntcohorten: één "met endometriose" en de
andere "zonder endometriose".
Endodiag heeft al een machtiging om menselijke monsters te importeren en de
lijst met buitenlandse bijdragers zal worden bijgewerkt wanneer het project
wordt goedgekeurd. Het belangrijkste doel is de analytische validatie van
biomarkers die zijn geïdentificeerd voor de diagnose van endometriose. Het
secundaire doel is de prognose van ziekterecidief na een operatie voor elke
patiënt.
Er wordt geen randomisatie en blindering uitgevoerd omdat het onderzoek geen
geneesmiddelen of een medisch hulpmiddel voor menselijk gebruik omvat.
Zowel de patiënt als de gezondheidswerker kennen de gezondheidsstatus van de
patiënt: endometriose hebben of niet.

2. Studieduur, chronologie en duur van elke periode
Totale studieduur: 2 jaar en 9 maanden
Inclusieperiode: gedurende 9 maanden, tot het bereiken van 975 patiënten.
Periode van deelname van de patiënt: 2 jaar: opname van de patiënt, operatie en
follow-up van de patiënt gedurende twee jaar na de operatie.

3. Uitsluitingsperiode van een ander klinisch onderzoeksprotocol
Patiënten kunnen deelnemen aan andere biomedische onderzoeksprotocollen,
behalve als het doel van het onderzoek de beoordeling is van een innovatieve
therapie voor endometriose of een andere ziekte; bijv. een nieuw medicijn. Een
behandeling kan de aard van verzamelde biologische monsters veranderen en
bijgevolg kunnen de analyseresultaten verschillen en een bias introduceren.

4. Experimenteel plan - praktisch proces
In deze studie begint het traject van de patiënt bij de pre-operatieve
consultatie, wanneer de arts aangeeft dat zij in aanmerking komt voor deelname
aan het onderzoek. Als de patiënt geïnteresseerd is in de studie, geeft haar
arts haar de informatiebrief en geïnformeerde toestemming om haar op de hoogte
te stellen van alle onderzoekscondities.
Wanneer de patiënt alle nodige informatie heeft geleerd, kan zij onmiddellijk
het toestemmingsformulier ondertekenen in duplicaatkopie (de ene bewaard door
de patiënt en de andere door het centrum), of de tijd nemen om na te denken
over haar deelname. Het toestemmingsformulier moet noodzakelijkerwijs worden
ondertekend en worden teruggestuurd naar het centrum voorafgaand aan het
verzamelen van persoonlijke gegevens, chirurgische ingrepen en het verzamelen
van monsters. De patiënt bewaart de informatiebrief en een kopie van het
ondertekende toestemmingsformulier. Deze informatie zal toegankelijk zijn op
het speciale webplatform voor patiënten.
Nadat het toestemmingsformulier is ondertekend, zal de arts de vragenlijsten
"patiëntendossier" en "medische geschiedenis" in het e-CRF invullen op basis
van door de patiënt verstrekte informatie. Deze gegevens worden verzameld
tijdens het consult en de arts zal een vakje aanvinken "verzendplatform login
e-mail naar de patiënt" en een e-mail zal automatisch naar de patiënt worden
gestuurd, waardoor verbinding en het invullen van de vragenlijsten mogelijk
wordt.
Op deze manier heeft de patiënt via internet toegang tot speciale online
vragenlijsten. Zij zal de secties "Patiëntendossier", "Uw medische
geschiedenis", "Uw gezondheidsgegevens" en "Kwaliteit van leven" kunnen
invullen.
De definitieve bevestiging van opname door de patiënt in het onderzoek wordt
gedaan door haar arts, afhankelijk van de bevindingen tijdens laparoscopische
chirurgie. Deze operatie is bedoeld om patiënten met endometriose of een andere
procedure voor een niet-endometriose-aandoening te diagnosticeren of te
behandelen. Tijdens deze operatie zal de arts monsters verzamelen die bedoeld
zijn om door de sponsor te worden gebruikt voor onderzoeksdoeleinden met
endometriose.
Een deel van het monster is gereserveerd voor de pathologieafdeling om de
aanwezigheid of afwezigheid van endometriose te diagnosticeren; het andere deel
wordt voor onderzoeksdoeleinden naar Endodiag gestuurd. De patiënt wordt
officieel alleen opgenomen na diagnostische bevestiging van endometriose voor
"endometriosecategorie van patiënt" en "niet-endometriosecategorie voor
controlepatiënt". Elke patiënt voor wie een endometriumbiopsie werd verzameld,
zal worden opgenomen in de studie, in de groep "endometriosepatiënt" of in de
"controlegroep"; er zal geen bemonstering plaatsvinden zonder opname van de
patiënt in het onderzoek.
Na de operatie zal de arts alleen, zonder de patiënt, de sectie "chirurgie" van
de vragenlijst in de e-CRF invullen.
De patiënt zal het gebruikelijke medische zorgpad volgen dat door haar arts is
vastgesteld voor follow-up na de operatie.
Een jaar na de operatie zal de patiënt per e-mail worden benaderd om te
antwoorden op de vragenlijst "1 jaar follow-up" op het speciale webplatform.
Twee jaar na de operatie zal de patiënt per e-mail worden benaderd om te
antwoorden op de vragenlijst "2 jaar follow-up" op het speciale webplatform.

Het einde van de patiëntenparticipatie in het onderzoek komt 2 jaar na de
operatie.

De onderzoeken, monsterneming en consulten zijn meestal:
- Bezoeken: 1e consult, pre-operatief bezoek, operatie, postoperatief bezoek,
afhankelijk van door arts vastgesteld tijdschema;
- Medische procedures: laparoscopische chirurgie;
- Bemonstering: endometriose laesies, cysten van de eierstok, indien van
toepassing, bedoeld voor histologische analyse (1 cm), 1 buisje van 5 ml
peritoneale vloeistof of, bij gebrek daaraan, peritoneale lavage.

Medische onderzoeken, bemonstering en extra bezoeken die speciaal zijn
uitgevoerd voor onderzoeksdoeleinden zijn:
- Bezoeken: geen extra bezoek;
- Medische procedures: geen aanvullende procedures anders dan die al zijn
gepland voor de gebruikelijke medische zorg voor patiënten;
- Bemonstering: endometriale biopsie met Cornier Pipelle (max. 2 cm) en 4
buizen met 5 ml bloed.

De biologische monsters worden verzameld tijdens laparoscopische chirurgie;
endometriale bemonstering wordt uitgevoerd met een intravaginale Cornier
Pipelle (verstrekt in de bemonsteringsset) en bloedafname wordt uitgevoerd vóór
anesthesie of tijdens een operatie door een verpleegkundige in het klinische
centrum.
Monsters worden verzameld in de bemonsteringsset die door de sponsor wordt
geleverd. Deze set bestaat uit alle benodigde containers voor elk type monster:
- 2 tubes van 5 ml met EDTA om bloed te verzamelen;
- 2 tubes van 5 ml bloedvrij om serum te verzamelen;
- 1 tube van 5 ml met heparine om peritoneale vloeistof te verzamelen;
- 2 containers van elk 5 ml formaline om endometriotische laesies en een
endometriumbiopsie te verzamelen;
- 1 container met 20 ml formaline om ovariumcysten te verzamelen;
- 1 container met kweekmedium om endometriose laesies te verzamelen;
- 1 container met 2 ml RNAlater voor de endometriale biopsie.
Het bevat ook de Cornier Pipelle die nodig is voor het uitvoeren van
endometriale weefselmonsters.

De interventie is een laparoscopie die gepland is voor diagnose of behandeling van endometriose (endogroep) of een andere indicatie (controlegroep). De operatie wordt niet speciaal uitgevoerd voor de studiebehoeften.

Samenvatting van voorspelbare en bekende voordelen en risico's voor
studiedeelnemers

1. Voordelen voor patiënten
Er is geen direct klinisch voordeel voor de deelnemers aan dit onderzoek.
Monsters en klinische gegevens worden alleen voor onderzoeksdoeleinden
gebruikt. Laboratoriumanalyses uitgevoerd op monsters (IHC en moleculaire
biologie) en op geanonimiseerde gegevens (statistische studies en
waarschijnlijkheidsberekeningen) zullen niet onmiddellijk informatie opleveren
over de gezondheid van patiënten en zijn zonder consequenties voor hun medische
zorg.

Studie resultaten kunnen leiden tot de ontwikkeling van op de markt gebrachte
producten, zonder financieel voordeel voor patiënten.

2. Risico's voor patiënten
Bekende en te verwachten risico's voor onderzoeksdeelnemers houden
hoofdzakelijk verband met chirurgische ingrepen die worden uitgevoerd als
onderdeel van de patiëntenzorg (laparoscopische chirurgie onder algemene
anesthesie, endometriotische laesiebiopsie, peritoneale vloeistofbemonstering)
en monsters die specifiek zijn voor het onderzoek (bloedmonsters en
endometriumbiopsie). Zoals hieronder wordt uitgelegd, komen sommige verzamelde
weefsels voort uit uitgebreide bemonstering in de chirurgische context van de
gebruikelijke medische zorg voor patiënten en sommige andere worden specifiek
voor de onderzoeksstudie gedaan.
De hieronder genoemde risico's differentiëren geen specifieke medische
procedures voor onderzoek en procedures die al zijn gepland in de medische zorg
van de patiënt.
1) Risico's gerelateerd aan laparoscopie
• Post-operatieve pijn kan optreden vanwege cutane incisies;
• Verschijnselen van voorbijgaande aard: duizeligheid, slapeloosheid,
vermoeidheid, concentratiestoornissen, buikpijn en / of rugpijn;
• Zeer zeldzame maar ernstige complicaties die een spoedbehandeling vereisen:
hemorragie, fistels, orgaan- of bloedvatletsels als gevolg van
instrumentinjectie;
• Onmogelijkheid om de chirurgische ingreep uit te voeren (verklevingen,
gevolgen van eerdere operaties, anatomische anomalie, technische problemen,
onverwachte complicaties, enz.), Waarbij het stoppen van de operatie of het
overschakelen naar de traditionele procedure, laparotomie (open buik)
noodzakelijk is.

2) Risico's gerelateerd aan algemene anesthesie
• Geprojecteerde schouderpijn als gevolg van CO2-gas dat aan het einde van de
operatie niet is geëvacueerd;
• Misselijkheid, braken na het ontwaken;
• Zere keel, heesheid, slikproblemen, dentale laesies als gevolg van de
introductie van het ademhalingshulpmiddel;
• Zenuw-, spier- en huidbeschadiging: tijdelijke verdoving of reversibele
verlamming;
• geheugenstoornissen, verminderd concentratievermogen;
• Roodheid of pijn bij de injectieplaats van de anesthesie;
• Zeer zelden (één keer in enkele honderdduizenden gevallen): ernstige reacties
tijdens anesthesie: allergie voor anesthetica, hartstilstand, verstikking.

3) Risico's gerelateerd aan bloedtekenen
• Incident: hematoom als gevolg van zeer strakke tourniquet, moeilijke
bemonstering (niet-zichtbaar, te diep, zeer dunne aderen, mobiel, herhaalde
puncties, vroege sclerose, onrustig gedrag van de patiënt), duizeligheid (angst)
• Ongeval: naaldpunctie (besmetting met hepatitis B, C of Delta of HIV),
mediane zenuwpunctie (reversibele zenuwlaesie, zeer zelden een defect in een
motor of sensorische zenuw), hypocalciëmie: diabetische coma, syncope (volledig
bewustzijnsverlies voor ongeveer 10 seconden)

4) Risico's gerelateerd aan endometriale biopsie, in volgorde van toenemende
waarschijnlijkheid
• Aanzienlijke bloeding;
• Bloeding gedurende meer dan twee dagen na biopsie;
• Klein bloedverlies en ongemak;
• Koorts of koude rillingen;
• Infectie;
• Ernstige pijn in de onderbuik;
• Abnormale en / of stinkende vaginale afscheiding

5) Risico's gerelateerd aan de inzameling van peritoneale vloeistoffen
• Bloeden op het punctie gebied, zelfs intraperitoneale bloeding;
• secundaire infectie van de vloeistof;
• Intestinale laesie;
• Verlies van eiwitten en elektrolyten;
• Flauwvallen, zelfs vasovagale shock, vooral wanneer de uitputting te snel is.