Bestuderen van kolonisatie en luchtweginfecties in kinderen met dagelijkse minimaal-invasieve nasal sampling methoden

Luchtweginfecties zijn een belangrijke oorzaak van morbiditeit bij jonge
kinderen in rijke landen en de belangrijkste doodsoorzaak in
ontwikkelingslanden. De etiologie van luchtweginfecties is vaak polymicrobieel,
waarbij bekende virale of bacteriële pathogenen of combinaties van beide
betrokken zijn. De veroorzakende pathogenen vinden bijna allemaal hun oorsprong
in de nasopharynx. Deze bacteriën zijn regelmatig te vinden in de nasopharynx
van asymptomatische kinderen en leven daar samen met andere veronderstelde
onschadelijke commensalen, zonder ziekte te veroorzaken. Samen vormen ze een
complexe bacteriële gemeenschap, het nasofaryngeale (NP) bacteriële microbioom.
Naast bacteriën worden ook virussen aangetroffen in de nasopharynx tijdens
luchtweginfecties en ook bij asymptomatische personen. Deze infecties zijn
belangrijk voor overdracht (transmissie), als tussenstap naar ziekte en ze
versterken immuunresponsen uiteindelijk leidend tot bescherming. Dergelijke
infecties zijn buitengewoon dynamisch van aard, maar zeer weinig studies hebben
ze kunnen karakteriseren vanwege het ongemak dat verband houdt met klassieke
bemonsteringsmethoden, zoals nasofaryngeale uitstrijkjes (NPS). We hebben
onlangs het gebruik van minimaal invasieve nasale bemonsteringsmethoden
gevalideerd die thuis kunnen worden gedaan door de ouders voor de studie van
gastheer- en microbiële parameters bij volwassenen en kinderen. In deze studie
zullen we ons richten op de dagelijkse microbiële en immunologische
samenstelling van de nasopharynx tijdens gezondheid in relatie tot symptomen.

Primair:
Associatie van kolonisatie door pneumokokkenbacterie met niveaus van reeds
bestaande polysaccharide-specifieke geheugen B-cellen.

Secundair:
a) Het gebruik van synthetische absorberende matrices (SAM) valideren voor de
detectie van andere (niet pneumokokken) respiratoire pathogenen versus NPS en
speeksel.
b) De dynamiek van URT-infectie / kolonisatie voor pneumokokken en andere
pathogenen beoordelen.
c) Onderzoek naar de relatie tussen lokale en systemische immuunresponsen
gemeten door SAM en URT-infectie / kolonisatiedynamiek.
d) Het effect van inkomende bacteriën / virussen op de microbiota bepalen en
vice versa.
e) Om gastheer- en microbiële parameters te meten die geassocieerd zijn met
lokale immuunversterking tijdens kolonisatie / infectie.
f) Breng symptomen van verkoudheid in verband met URT-kolonisatie / infectie en
gerelateerde reacties van de gastheer.
g) Meet de overdracht tussen kinderen en ouders en immuunresponsen bij ouders.

Om de bovenstaande doelstellingen te bereiken, zullen we een prospectieve
cohortstudie op de gemeenschap uitvoeren. De deelnemers in de leeftijd van 1
tot en met 5 jaar worden indien nodig geworven in gemeentes in Noord-Holland
en/of Zuid-Holland . We vragen toegang tot informatie uit de basisregistratie
personen (BRP) aan bij gemeentes in Noord-Holland en/of Zuid-Holland. De
gemeente stuurt vervolgens de informatie naar een verzendlocatie. Het
onderzoeksteam zorgt dat de folders bij de verzendlocatie zijn en vandaar
worden ze verstuurd naar de ouders. Mogelijke deelnemers krijgen dan een flyer
met een QR code en kunnen zich aanmelden via deze website of via het emailadres
op de flyer. Vervolgens worden geïnteresseerde ouders door een lid van het
studieteam persoonlijk of telefonisch geïnformeerd over de studieprocedures en
krijgen ze voldoende tijd (minimaal 1 week) om te besluiten deel te nemen. Het
onderzoek voor elke deelnemer duurt 28 dagen.

We zullen dit onderzoek buiten vakantieperiodes uitvoeren, aangezien wordt
verwacht dat infectie / kolonisatie in deze periode vaker voorkomt. We willen
in totaal 45 deelnemers opnemen (zie paragraaf 3.4 voor het berekenen van de
steekproefomvang). Dit is inclusief een pilot groep van 10 kinderen (5 in de
oudste groep en 5 in de jongste) om te evalueren hoe goed het afnemen van de
monsters over deze periode wordt verdragen, wat wordt gedaan met een
questionnaire. Als er tijdens de studie niet genoeg pneumokokken-acquisities
zijn (n = 8), zullen we maximaal 10 extra kinderen werven, met een maximum van
3-4 kinderen per keer tot het aantal van 8 acquisities is bereikt. Bovendien
kunnen deelnemers die zich tijdens het onderzoek terugtrekken, worden vervangen
zoals aangegeven in 8.5.

Als er in een gezin meer dan één in aanmerking komende kinderen zijn, kunnen ze
tegelijkertijd worden opgenomen. Bovendien, als een gezin bestaat uit één kind
of meerdere kinderen die allemaal deelnemen, zullen we ouders vragen om zelf
speeksel op te vangen om microbiële en immuunparameters te meten.

De afnames en studieprocedures zijn te vinden in figuur 1 en paragraaf 7.3 van
het studie protocol

Deelname aan dit onderzoek brengt geen extra risico's met zich mee dan
verwaarloosbare risico's en geen voordelen. Alle bemonsteringsmethoden zijn
minimaal invasief en worden algemeen aanvaard als volledig veilig. We hebben
ruime ervaring met het verzamelen van deze monsters. Het nasopharyngeale
(transneus) wattenstaafje kan een kort (2-3 seconden) onaangenaam prikkelend
gevoel, hoesten en tranende ogen geven. In zeer zeldzame gevallen kan een
minimale zelflimiterende bloedneus optreden (minder dan 1: 3000). In het geval
van een bloedneus zal het lid van het onderzoeksteam standaardzorg verlenen
volgens de standaard operationele procedures. Bij kinderen wordt een
nasofaryngeaal (trans-nasaal) uitstrijkje echter goed verdragen, omdat ze
anatomisch een zeer korte en gemakkelijk toegankelijke nasofaryngeale nis
hebben. Bij het verzamelen van de andere monsters zijn geen bijwerkingen te
verwachten

-veneus bloed: 2 ml bloed wordt afgenomen door middel van venapunctie,
uitgevoerd door een ervaren en getraind lid van het onderzoeksteam. Dit wordt
als invasief beschouwd, maar infecties zijn zeldzaam en het ongemak is van
voorbijgaande aard.
- nasopharyngeaal uitstrijkje: een klein uitstrijkje wordt in de neus van de
nasopharynx ingebracht en er wordt wat slijm verzameld. Dit is een
niet-invasieve techniek. De procedure kan een kort moment van ongemak
veroorzaken, maar de duur van deze procedure is minder dan 10 seconden en het
wattenstaafje is erg zacht. Deze procedure wordt uitgevoerd door een getraind
lid van het onderzoeksteam. Kleine complicaties (zoals een bloedneus) zijn
beschreven, maar zijn zeldzaam.
- Speekselmonster: minimaal 1 ml speeksel wordt door alle deelnemers verzameld
met behulp van twee orale sponzen. De sponzen worden in de mond gehouden
(kleine kinderen worden bijgestaan **door een lid van het studieteam ouders /
verzorgers) totdat deze verzadigd is met speeksel. Dit veroorzaakt geen ongemak.
- SAM-strip: een nasosorptiestrip wordt verzameld door deze 30 seconden in de
neus te brengen. Deze procedure wordt uitgevoerd door ouders of verzorgers. Dit
wordt beschouwd als een niet-invasieve procedure, maar kan leiden tot een
kietelend gevoel terwijl het papier in de neus zit en vereist dat kinderen 30
seconden stil blijven zitten.

Er is geen duidelijk klinisch voordeel voor de proefpersonen die aan het
onderzoek deelnemen. Met de resultaten van dit onderzoek willen we echter meer
informatie krijgen over luchtweginfecties waar kinderen een verhoogd risico op
lopen.

Aangezien kinderen de risicopopulatie zijn en andere immuun- en microbiële
kenmerken vertonen in vergelijking met volwassenen, kan deze studie alleen bij
kinderen worden uitgevoerd. Wij volgen de Code Verzet door minderjarigen die
deelnemen aan medisch onderzoek, zoals aangegeven door de CCMO. De
bemonsteringsmomenten inclusief ondertekening van de geïnformeerde toestemming
zullen tijdens de onderzoeksperiode minder dan 2 uur tijd in beslag nemen.